| 鸭疫里默氏杆菌Porin蛋白的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立与应用 |
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| 引用本文： | 包涛涛,鲜思美,顾庆林,杨倩,梁倩,杨先富,吴通奎,王正文,廖飞.鸭疫里默氏杆菌Porin蛋白的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立与应用[J].中国兽医学报,2022(9):1830-1837. |
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| 作者姓名： | 包涛涛 鲜思美 顾庆林 杨倩 梁倩 杨先富 吴通奎 王正文 廖飞 |
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| 作者单位： | 1. 贵州大学动物科学学院;2. 贵州省黔东南州农业农村局;3. 贵州省动物疫病研究所;4. 贵州农业职业学院 |
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| 摘 要： | 旨在建立一种新型可适用于鸭疫里默氏杆菌(RA)病抗体检测的间接ELISA方法。以血清2型RA贵州分离株为研究对象，将其微孔蛋白Proin编码的基因克隆至pET-32a载体，构建重组表达质粒pET-32a-porin,在E.coli BL21(DE3)中使用IPTG诱导后表达。以纯化后的Porin蛋白作为包被抗原，通过一系列条件的优化建立一种检测RA抗体的间接ELISA方法，对其性能进行综合评价。结果显示，该方法具有较好的敏感性、重复性及特异性，阳性血清经1∶6 400稀释后检测结果仍为阳性，批内变异系数(CV)在1.27%～4.90%之间，批间CV在2.59%～5.43%之间，该方法可特异性地检测出抗RA抗体，与禽流感病毒(AIV)H5亚型、AIV H7亚型、新城疫病毒(NDV)、鸭圆环病毒(DuCV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)及E.coli阳性血清均无交叉反应，与商品化ELISA抗体试剂盒检测相比，两者符合率为97.26%。使用建立的ELISA方法对临床采集的801份样品血清开展抗体检测分析(626份为已免疫鸭传染性浆膜炎二价灭活疫苗“血清1型+血清2型”的样品血清，175份为未免...
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| 关 键 词： | 鸭疫里默氏杆菌 Porin蛋白 ELISA |
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