| 基于gL蛋白的牛传染性鼻气管炎间接ELISA检测方法的建立及初步应用 |
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| 引用本文： | 张鹿,付祥,柳翠翠,陈钰彬,郭珂宇,赵桂新,张志强,史秋梅,吴同垒.基于gL蛋白的牛传染性鼻气管炎间接ELISA检测方法的建立及初步应用[J].中国兽医学报,2022(12):2363-2367. |
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| 作者姓名： | 张鹿 付祥 柳翠翠 陈钰彬 郭珂宇 赵桂新 张志强 史秋梅 吴同垒 |
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| 作者单位： | 河北科技师范学院河北省预防兽医学重点试验室 |
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| 基金项目： | 河北省高等学校科学技术研究资助项目(BJK2022005)； |
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| 摘 要： | 为建立牛传染性鼻气管炎(infectious bovine rhintracheitis, IBR)的血清学诊断方法，本试验对牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhintracheitis virus, IBRV)gL蛋白进行原核表达和纯化，作为包被抗原，建立了间接ELISA检测方法。结果显示，iELISA方法的最优反应条件：抗原包被质量浓度为0.773 mg/L,4℃过夜；3%BSA、37℃封闭1 h;血清1∶20稀释，室温孵育30 min;二抗稀释度为1∶5 000,37℃孵育30 min;底物反应条件为37℃5 min。特异性试验结果显示，该方法仅与IBR阳性血清反应呈阳性，而与牛口蹄疫(FMD)、牛病毒性腹泻(BVD)、布鲁菌病的阳性血清无交叉反应。敏感性试验结果显示，阳性血清1∶640稀释时检测结果仍呈阳性，表明该方法敏感性较高。重复性试验结果显示，批内变异系数为1.9%～7.7%,批间变异系数为2.6%～4.6%。对171份牛血清进行IBRV抗体检测，本试验建立的iELISA方法检出阳性样品67份，阳性率为39%;商品化试剂盒检出阳性样品60份，阳性...
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| 关 键 词： | 牛传染性鼻气管炎 gL蛋白 间接ELISA |
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