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| 禽流感病毒M2e基因与鸡IgG Fc基因在巴斯德毕赤酵母中的融合表达 | |
| 引用本文： | 尚书文,侯继波,徐公豹.禽流感病毒M2e基因与鸡IgG Fc基因在巴斯德毕赤酵母中的融合表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2008,36(1):17-22. |
| 作者姓名： | 尚书文 侯继波 徐公豹 |
| 作者单位： | 1. 南京农业大学,农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室,江苏,南京,210095;江苏省农业科学院,兽医研究所,江苏,南京,210014 2. 江苏省农业科学院,兽医研究所,江苏,南京,210014 3. 南京农业大学,农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室,江苏,南京,210095 |
| 基金项目： | 江苏省科技厅高新技术基金 |
| 摘 要： | 【目的】得到融合蛋白M2e-Fc,并检测其免疫学特性,为研制禽流感通用疫苗奠定基础。【方法】根据禽流感病毒H5N1的M2e蛋白氨基酸序列设计2条长互补引物,通过重叠区互补扩增基因法扩增出目的基因M2e,然后与鸡IgGFc片段基因一起克隆入毕赤酵母表达质粒中,构建酵母表达载体。将阳性质粒线性化后电转化入感受态毕赤酵母X-33中,再经甲醇诱导后,通过Tricine-SDS-PAGE电泳及Western-blotting鉴定融合蛋白。之后用其免疫非免疫鸡,检验其免疫原性。【结果】成功构建了表达M2e和Fc融合蛋白的酵母表达载体pPICZαA-M2-Fc,并通过Zeocin筛选及PCR鉴定出了阳性重组子;阳性重组子经甲醇诱导后得到融合蛋白,Tricine-SDS-PAGE电泳及Western-blotting鉴定证实,融合蛋白得到正确表达,并且可以与M2e阳性血清反应。动物免疫试验证实,该融合蛋白可以诱导鸡产生抗M2e抗体,具有良好的免疫原性。【结论】融合蛋白M2e-Fc在巴斯德毕赤酵母表达系统中得到了成功表达,该融合蛋白具有较好的免疫原性,为后期进行其他免疫试验奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 禽流感病毒 M2e基因 鸡IgGFc基因 巴斯德毕赤酵母 |
| 文章编号： | 1671-9387（2008）01-0017-06 |
| 收稿时间： | 2007-01-17 |
| 修稿时间： | 2007年1月17日 |
Expression of a fusion protein of influenza virus matrix 2 protein ectodomain segments (M2e) and avain IgG Fc in Pichia pastoris |
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| YUE Tian-li,YANG Kang,YUAN Ya-hong,FENG Fan.Expression of a fusion protein of influenza virus matrix 2 protein ectodomain segments (M2e) and avain IgG Fc in Pichia pastoris[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2008,36(1):17-22. | |
| Authors: | YUE Tian-li YANG Kang YUAN Ya-hong FENG Fan |
| Institution: | 1(1 Key Laboratory of Animal Disease Diagnostic and Immunology,Ministry of Agriculture,Nanjing Agricultural University,Nanjing,Jiangsu 210095,China;2 Institute of Veterinary Science of Jiangsu Academy of Agriculture Science,Nanjing,Jiangsu 210014,China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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