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香菇银染mRNA差异显示体系的建立及条件优化
引用本文:罗志姣,蔡为明,李南羿,吴坤.香菇银染mRNA差异显示体系的建立及条件优化[J].食用菌学报,2009,16(1).
作者姓名:罗志姣  蔡为明  李南羿  吴坤
作者单位:1. 河南农业大学生命科学学院,河南郑州,450002
2. 浙江省农业科学院园艺所,浙江杭州,310021
摘    要:为建立适用于研究香菇(Lentinula edodes)分化中基因表达差异的银染差异显示方法,以香菇突变株fbd1及其出发菌株98411的菌丝体和子实体为材料,采用Trizol法提取总RNA,优化了反转录和PCR扩增中5项反应参数,再经6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离和银染显示差异条带.试验结果表明,适宜分析香菇mRNA差异的反转录体系中RNA投入量为0.5~1 μg、dNTP浓度为20 μmol/L,PCR扩增反应MgCl2、dNTP和Taq酶分别为2 mmol/L、200 μmol/L和1.0 U,此条件下,目标条带清晰且重复性好.

关 键 词:香菇  差异表达  显示体系  银染

Optimization of a Silver Stain Display Protocol for Studying Differentially Expressed Genes in Lentinula edodes
LUO Zhijiao,CAI Weiming,LI Nanyi,WU Kun.Optimization of a Silver Stain Display Protocol for Studying Differentially Expressed Genes in Lentinula edodes[J].Acta Edulis Fungi,2009,16(1).
Authors:LUO Zhijiao  CAI Weiming  LI Nanyi  WU Kun
Abstract:
Keywords:
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