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A型口蹄疫病毒VP1蛋白间接ELISA检测方法的建立
引用本文:卢清侠,刘 畅,郭官鹏,邢广旭,刘运超,邓瑞广,张改平.A型口蹄疫病毒VP1蛋白间接ELISA检测方法的建立[J].西北农业学报,2014,23(1):30-35.
作者姓名:卢清侠  刘 畅  郭官鹏  邢广旭  刘运超  邓瑞广  张改平
作者单位:(1. 河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室,郑州 450002; 2.河南农业大学 牧医工程学院,郑州 450002)
基金项目:NSFC 河南人才培养联合基金 (U1204327);河南省级重点实验室建设专项(122300413217)。
摘    要:以原核表达经纯化复性制备的A型口蹄疫病毒(FMDV)VP1蛋白代替传统病毒抗原包被,建立快速、安全、有效的A型FMDV抗体ELISA检测方法。对前期制备的A型VP1蛋白进行Western-Blot检测,结果表明,VP1蛋白能够特异性识别A型FMDV阳性牛血清,可作为检测抗原建立检测A型FMDV抗体的方法。以最佳质量浓度1mg/L VP1蛋白为检测抗原,方阵滴定法确定最佳检测血清稀释度为1∶50V(血清)∶V(封闭液)],最佳的酶标二抗稀释度为1∶2 000V(酶标二抗)∶V(封闭液)],建立A型FMDV抗体ELISA检测方法。该方法的敏感性为94.32%,特异性为99.09%,批内与批间重复试验变异系数均小于8%。采用该方法检测201份临床血清,与液相阻断ELISA试剂盒的符合率达92.54%。研制的VP1-ELISA试剂盒特异、敏感、稳定、操作简便,可用来监控A型口蹄疫抗体水平。

关 键 词:A型口蹄疫病毒  VP1蛋白  间接ELISA

Establishment of Indirect ELISA Diagnose Based on the VP1 Protein of Foot and Mouth Disease Virus Serotype A
LU Qingxi,LIU Chang,GUO Guanpeng,XING Guangxu,LIU Yunchao,DENG Ruiguang and ZHANG Gaiping.Establishment of Indirect ELISA Diagnose Based on the VP1 Protein of Foot and Mouth Disease Virus Serotype A[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2014,23(1):30-35.
Authors:LU Qingxi  LIU Chang  GUO Guanpeng  XING Guangxu  LIU Yunchao  DENG Ruiguang and ZHANG Gaiping
Abstract:
Keywords:Foot and mouth disease virus serotype A  VP1 protein  Indirect ELISA
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