| 棉花GhPAO3基因的CRISPR/Cas9表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 朱雪峰,田文刚,熊显鹏,薛飞,张莉,朱华国.棉花GhPAO3基因的CRISPR/Cas9表达载体的构建[J].新疆农业科学,2019(2). |
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| 作者姓名： | 朱雪峰 田文刚 熊显鹏 薛飞 张莉 朱华国 |
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| 作者单位： | 石河子大学/新疆生产建设兵团绿洲生态农业重点实验室 |
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| 摘 要： | 【目的】研究棉花GhPAO3基因的功能,通过CRISPR/Cas9技术构建棉花GhPAO3基因的基因编辑载体。【方法】筛选合适的两个PAM位点设计引物,在引物中添加接头,重叠延伸PCR,将两个靶标片段连接在一起。通过限制性核酸内切酶BsaⅠ对pRGEB32-7载体进行单酶切,使用一步法连接重叠延伸产物与线性化的pRGEB32-7载体。【结果】使用电击转化法将构建好的棉花GhPAO3基因的基因编辑载体转入农杆菌LBA4404感受态,通过卡那霉素筛选阳性单克隆菌株。【结论】条带大小与预期一致,棉花GhPAO3基因的基因编辑载体构建成功。
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| 关 键 词： | 棉花 CRISPR/Cas9 基因编辑 GhPAO3 |
Construction of CRISPR/Cas9 Expression Vector of GhPAO3 Gene in Cotton |
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