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花生蔗糖合酶基因AhSuSy的克隆和干旱胁迫表达分析
引用本文:何美敬,刘立峰,穆国俊,侯名语,陈焕英,崔顺立.花生蔗糖合酶基因AhSuSy的克隆和干旱胁迫表达分析[J].作物学报,2012,38(12):2139-2146.
作者姓名:何美敬  刘立峰  穆国俊  侯名语  陈焕英  崔顺立
作者单位:河北农业大学农学院 / 河北省作物种质资源重点实验室, 河北保定 071001
基金项目:国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-14);河北省应用基础研究计划重点基础研究项目(10960120D);河北省高等学校科学技术研究重点项目(ZD2010136)资助
摘    要:蔗糖合酶(sucrose synthase, SuSy)是蔗糖代谢途径中的关键酶, 在植物生长、发育和渗透调节过程中起着重要的作用。本研究利用同源克隆、RACE和TAIL-PCR相结合的方法从花生叶片中分离了蔗糖合酶基因, 命名为AhSuSy (GenBank登录号JF346233)。该基因cDNA序列全长2 790 bp, 包含一个2 421 bp的开放阅读框(ORF), 5′端非编码区57bp, 3¢端非编码区为312 bp。根据编码区预测AhSuSy编码806个氨基酸, 与大豆、拟南芥、玉米等植物中相关蛋白的氨基酸序列同源性达75%以上; 成功构建了该基因的原核表达载体pET32a-AhSuSy, 在IPTG诱导下得到92 kD左右的蛋白, 与理论值一致。半定量RT-PCR分析表明AhSuSy在花生根、茎、叶中均有表达。利用10%PEG模拟干旱处理花生幼苗, 分析胁迫后AhSuSy的转录水平, 同时测定蔗糖合酶活性和蔗糖含量, 发现三者均表现为处理后4~12 h逐渐升高, 相关性分析显示花生中蔗糖含量与蔗糖合酶活性的相关系数达0.993(P=0.007<0.01), 处理后12~24 h逐渐降低。推测该基因响应干旱调控, 在花生抗旱胁迫中可能起着一定的作用。

关 键 词:花生  蔗糖合酶基因  克隆  半定量RT-PCR  表达分析
收稿时间:2012-07-15

Molecular Cloning of Sucrose Synthase Gene and Expression Analysis under Drought Stress in Peanut (Arachis hypogaea L.)
HE Mei-Jing , LIU Li-Feng , MU Guo-Jun , HOU Ming-Yu , CHEN Huan-Ying , CUI Shun-Li.Molecular Cloning of Sucrose Synthase Gene and Expression Analysis under Drought Stress in Peanut (Arachis hypogaea L.)[J].Acta Agronomica Sinica,2012,38(12):2139-2146.
Authors:HE Mei-Jing  LIU Li-Feng  MU Guo-Jun  HOU Ming-Yu  CHEN Huan-Ying  CUI Shun-Li
Institution:Key Laboratory of Crop Germplasm Resources of Hebei Province / College of Agronomy, Agricultural University of Hebei, Baoding 071001, China
Abstract:
Keywords:Peanut  Sucrose synthase gene  Cloning  Semi-quantitative RT-PCR  Expression analysis
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