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黄鳝性腺抑制差减文库的构建和分析
引用本文:曲宪成,尚晓莉,程翠,曲学伟,张勇,张开岳,蒋骄云.黄鳝性腺抑制差减文库的构建和分析[J].中国水产科学,2011,18(1):23-28.
作者姓名:曲宪成  尚晓莉  程翠  曲学伟  张勇  张开岳  蒋骄云
作者单位:1. 上海海洋大学,水产与生命学院,上海,201306
2. 烟台市牟平区渔业技术服务中心,山东,烟台,264100
基金项目:上海市重点学科建设项目
摘    要:应用抑制性差减杂交技术构建了黄鳝(Monopterus albus)Ⅳ期卵巢和间期性腺的差减cDNA文库.正向差减杂交以间期性腺为试验方,Ⅳ期卵巢为驱动方;反向差减杂交以Ⅳ期卵巢为试验方,间期性腺为驱动方.将获得的差减cDNA片段连接质粒载体,然后转化大肠杆菌DH5α,最后获得的正、反向差减文库分别含461、678个重组子.经PCR扩增鉴定插入片段范嗣为200~2000 bp.随机选取正、反文库共100个阳性克隆测序分析,得到90个有效基因片段,与GenBank进行BLASTx和BLASTn同源比对.进一步从文库中选取2个基因用于半定量RT-PCR,对文库质量进行验证.结果表明,所建文库能够达到富集这两期性腺差异表达基因的目的.黄鳝性腺差减文库的构建,为进一步分离、鉴定黄鳝性腺发育和性逆转的相关基因奠定了基础.

关 键 词:黄鳝  性腺  抑制性差减杂交  差减cDNA文库
修稿时间:2011/1/13 0:00:00

Construction and analysis of gonad suppression subtractive hybridization library of rice field eel(Monopterus albus)
QU Xiancheng,SHANG Xiaoli,CHENG Cui,QU Xuewei,ZHANG Yong,ZHANG Kaiyue,JIANG Jiaoyun.Construction and analysis of gonad suppression subtractive hybridization library of rice field eel(Monopterus albus)[J].Journal of Fishery Sciences of China,2011,18(1):23-28.
Authors:QU Xiancheng  SHANG Xiaoli  CHENG Cui  QU Xuewei  ZHANG Yong  ZHANG Kaiyue  JIANG Jiaoyun
Institution:QU Xiancheng1,SHANG Xiaoli1,CHENG Cui1,QU Xuewei2,ZHANG Yong1,ZHANG Kaiyue1,JIANG Jiaoyun1 1.College of Fisheries and Life Sciences,Shanghai Ocean University,Shanghai 201306,China,2.Muping District Yantai Fisheries Technical Service Center,Yantai 264100
Abstract:
Keywords:Monopterus albus  gonad  suppression subtractive hybridization  subtractive cDNA library  
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