| 巴马香猪氨基肽酶N截短基因的克隆与原核表达 |
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| 引用本文： | 王文秀,张艳,王宝琴,谢金文,刘博,沈志强.巴马香猪氨基肽酶N截短基因的克隆与原核表达[J].动物医学进展,2017,38(8). |
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| 作者姓名： | 王文秀 张艳 王宝琴 谢金文 刘博 沈志强 |
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| 作者单位： | 1. 山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州,256600;2. 海南省农业科学院畜牧兽医研究所,海南海口,571100;3. 滨州学院生物工程学院,山东滨州,256600 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金地区科学基金项目，海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室开放课题，滨州学院实验技术研究项目 |
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| 摘 要： | 为获得猪流行性腹泻病毒(PEDV)受体猪氨基肽酶N(pAPN)抗原,提取巴马香猪小肠绒毛上皮的总RNA,PCR扩增获得pAPN基因的主要抗原区片段,并将其克隆至原核表达载体pET-32a中,将重组质粒pET-32a-pAPN转化大肠埃希菌BL21,通过不同浓度的IPTG、不同诱导时间进行诱导表达,以确定目的蛋白表达的最佳条件。经SDS-PAGE和抗组氨酸标签的单抗进行Western blot检测重组蛋白在大肠埃希菌中的表达,结果显示,原核表达产物在诱导温度37℃、IPTG浓度为0.8mmol/L,诱导4h可获得最佳表达,产物分子质量约为45ku,获得的目的蛋白大小与预期一致。
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| 关 键 词： | 巴马香猪 氨基肽酶N 克隆 原核表达 |
Cloning and Prokaryotic Expression of Aminopeptidase N Truncation Gene in Bama Miniature Pig |
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| WANG Wen-xiu,ZHANG Yan,WANG Bao-qin,XIE Jin-wen,LIU Bo,SHEN Zhi-qiang.Cloning and Prokaryotic Expression of Aminopeptidase N Truncation Gene in Bama Miniature Pig[J].Progress In Veterinary Medicine,2017,38(8). |
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| Authors: | WANG Wen-xiu ZHANG Yan WANG Bao-qin XIE Jin-wen LIU Bo SHEN Zhi-qiang |
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