| 锦鲤疱疹病毒单交叉引物等温扩增检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 李聪慧,徐进,刘文枝,周勇,曾令兵.锦鲤疱疹病毒单交叉引物等温扩增检测方法的建立[J].水产学报,2015,39(9):1422-1431. |
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| 作者姓名： | 李聪慧 徐进 刘文枝 周勇 曾令兵 |
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| 作者单位： | 上海海洋大学水产与生命学院,中国水产科学研究院长江水产研究所,中国水产科学研究院长江水产研究所,中国水产科学研究院长江水产研究所,中国水产科学研究院长江水产研究所 |
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| 基金项目： | 国家大宗淡水鱼产业技术体系建设专项资金（CARS-46-11）；武汉市科技攻关项目（2014020202010138） |
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| 摘 要： | 本文根据锦鲤疱疹病毒(Koi herpes virus,KHV)保守的DNA聚合酶(Sph)基因,设计一组单交叉扩增引物,以构建的Sph基因重组质粒作为标准DNA模板,采用单交叉引物等温扩增技术(Single cross priming amplification,SCPA)进行扩增及优化反应体系,并结合核酸试纸条技术(Nucleic acid test strip detection method),建立了快速可视化检测锦鲤疱疹病毒的单交叉引物等温扩增检测方法(KHV-SCPA)。KHV-SCPA法可在63℃下60min内实现循环扩增,扩增产物经凝胶电泳呈现梯形条带,可特异性地检测出KHV,灵敏度较之常规PCR方法提高约1000倍。结合核酸试纸条检测技术,在3~5min内可对反应产物进行可视化检测。KHV-SCPA检测方法不依赖昂贵的仪器设备与专业技术人员,可应用于锦鲤疱疹病毒的现场快速检测中,为锦鲤疱疹病毒病的准确快速诊断和有效防控提供了技术支撑。
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| 关 键 词： | 锦鲤疱疹病毒 交叉引物 等温扩增 核酸试纸条 检测 |
| 收稿时间： | 4/3/2015 12:00:00 AM |
| 修稿时间： | 2015/5/15 0:00:00 |
Establishment of single cross priming isothermal amplification for Koi herpesvirus detection |
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| LI Conghui,XU Jin,LIU Wenzhi,ZHOU Yong and ZENG Lingbing.Establishment of single cross priming isothermal amplification for Koi herpesvirus detection[J].Journal of Fisheries of China,2015,39(9):1422-1431. |
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| Authors: | LI Conghui XU Jin LIU Wenzhi ZHOU Yong and ZENG Lingbing |
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| Institution: | Shanghai Ocean University,Yangtze River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Science,Yangtze River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Science,Yangtze River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Science,Yangtze River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Science |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Koi herpesvirus Cross primer Isothermal amplification Nucleic acid strip Detection |
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