| 猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株核蛋白基因在原核系统中的高效表达与初步应用 |
| |
| 引用本文： | 周艳君,童光志,薛强,仇华吉,王云峰,赵永刚,王玫.猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株核蛋白基因在原核系统中的高效表达与初步应用[J].中国预防兽医学报,2002,24(6):401-404. |
| |
| 作者姓名： | 周艳君 童光志 薛强 仇华吉 王云峰 赵永刚 王玫 |
| |
| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
| |
| 基金项目： | 获国家重点基础研究发展规划项目 (973)资助(G19990 1190 2 ) |
| |
| 摘 要： | 将猪繁殖与呼吸综合征病毒CH－1a株核蛋白基因克隆至原核表达载体pET30的多克隆位点中，经鉴定后得到重组质粒pET30a-N，将此重组质粒转化到受体菌BL21中，用诱导剂IPTG分别以不同浓度进行诱导，并在不同诱导时间进行采样，经处理后做SDS－PAGE、Western-blot分析，并以此为包被抗原进行ELISA检测，结果发现以终浓度为1mmol/L的IPTG进行诱导，4小时后表达可达到高峰，其大小约为23kD，薄层扫描结果表明庐蛋白表达量约占菌体蛋白总量的32％，该蛋白不仅与PRRSV阳性血清能发生特异性反应，而且可被PRRSV抗N蛋白单抗所识别，证实此大量表达的蛋白为核蛋白。将此表达产物应用ProBond^TM纯化系统进行纯化，其纯度可达到91％，纯化后的蛋白以50μg/孔包被96孔板，检测来自不同地区送检的猪血清，同时以全病毒ELISA为对照，结果发现二者的符合率高达93．3％，而应用该蛋白进行检测其反应更为敏感，且背景低，制备过程简单，这将为今后应用该蛋白作诊断抗原检测PRRSV奠定了基础。
|
| 关 键 词： | 猪 CH－1a株 核蛋白基因 原核系统 应用 PRRSV 繁殖呼吸综合征病毒 基因表达 |
| 文章编号： | 1008-0589(2002)06-0401-04 |
| 修稿时间： | 2002年5月18日 |
High-level Expression and Primary Application of Nucleocapsid Gene of PRRSV CH-1a Strain in Prokaryotic Expression System |
| |
| ZHOU Yan_jun,TONG Guang_zhi,XUE Qiang,QIU Huan_ji,WANG Yun_feng,ZHAO Yong_gang,WANG Mei.High-level Expression and Primary Application of Nucleocapsid Gene of PRRSV CH-1a Strain in Prokaryotic Expression System[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2002,24(6):401-404. |
| |
| Authors: | ZHOU Yan_jun TONG Guang_zhi XUE Qiang QIU Huan_ji WANG Yun_feng ZHAO Yong_gang WANG Mei |
| |
| Institution: | ZHOU Yan_jun,TONG Guang_zhi*,XUE Qiang,QIU Huan_ji,WANG Yun_feng,ZHAO Yong_gang,WANG Mei |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | PRRSV Nucleocapsid protein Expression Primary application |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
