茶树类黄酮3’,5’-羟化酶在大肠杆菌的表达和优化 |
| |
引用本文: | 陈啸天,高丽萍,赵磊,刘亚军,王云生,夏涛.茶树类黄酮3’,5’-羟化酶在大肠杆菌的表达和优化[J].安徽农业大学学报,2012,39(5):707-713. |
| |
作者姓名: | 陈啸天 高丽萍 赵磊 刘亚军 王云生 夏涛 |
| |
作者单位: | 1. 安徽农业大学生命科学学院,合肥,230036 2. 安徽农业大学教育部茶叶生物化学与生物技术重点实验室,合肥,230036 3. 安徽农业大学生命科学学院,合肥230036;安徽农业大学教育部茶叶生物化学与生物技术重点实验室,合肥230036 |
| |
基金项目: | 国家自然科学基金(30972401,31170647,31170282和31000314)共同资助 |
| |
摘 要: | 儿茶素是茶叶主要特征和功能成分之一,其中B环三羟基儿茶素约占儿茶素总量的65%以上。类黄酮3’,5’-羟化酶是类黄酮合成中B环5’羟基化的唯一酶系,与B环三羟基儿茶素合成积累密切相关。采用RACE技术,克隆了茶树类黄酮3’,5’-羟化酶基因的1 944 bp的全长序列,开放阅读框区域为55~1 587 bp,编码510个氨基酸,推测其分子量为57.1 kDa,等电点为9.06。该基因重组至pET-32a(+)表达载体上,在大肠杆菌Rosetta中进行原核表达;优化了原核表达中温度诱导条件;利用钴离子吸附柱纯化了目的蛋白。该研究为开展F3’5’H酶的反应动力学、酶的器官组织定位等研究奠定了基础。
|
关 键 词: | 茶树 类黄酮3’ 5’-羟化酶 RACE 原核表达 |
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录! |
| 点击此处可从《安徽农业大学学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《安徽农业大学学报》下载免费的PDF全文 |
|