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RT—PCR及RFLP分析技术对鸡传染性支气管炎病毒的诊断和S1基因分型的研究
引用本文:磨美兰,李康然,等.RT—PCR及RFLP分析技术对鸡传染性支气管炎病毒的诊断和S1基因分型的研究[J].中国预防兽医学报,2001,23(4):277-282.
作者姓名:磨美兰  李康然
作者单位:磨美兰(广西大学动物科技学院,南宁,530005)       李康然(广西大学动物科技学院,南宁,530005)       韦平(广西大学动物科技学院,南宁,530005)
基金项目:广西区教育厅科学基金资助项目
摘    要:本研究使用分别扩增整个S1整个S1糖蛋白基因(引物A)和S1糖蛋白基因N-端高变区I(引物B)的2对引物对3个IBV标准株M41、Connecticut、Arkansas及5个地方分离株(C60,D41A,D41B,A1121,A1171)进行RT-PCR扩增,用引物A时,有5个IBV毒株扩增到目的片段(1720bp);用引物B时,所有8个IBV毒株均得到与预丈夫大小相符的目的产物(228bp),对1720bp的PCR产物用限制性内切酶HaeⅢ进行酶切,结果得出3个不同的RFLP图谱,其中M41、Connecticut、D41B具有相同的HacⅢ酶切图谱,Arkansas和D41A则分别具有互不相同的图谱;对228bp的PCR产物进行DdeI、RsaI限制性内切酶消化,根据它们的RFLP图谱,8个IBV毒株可分为5个基因型,综合2对引物的PCR产物的PCR产物的RFLP分析结果,8个IBV毒株可分为7个基因型,分型的结果与传统的血清学方法吻合,本研究建立的方法和技术具有快速、简单、特异灵敏等优点,为现场流行毒株的定型(基因型/血清型)及其S1基因变异的跟踪研究以及更有效防制传染性支气管炎奠定了基础。

关 键 词:鸡传染性支气管炎病毒  S1基因  反转录酶多聚酶链反应  限制性片段多态性分析  分型
文章编号:1008-0589(2001)04-0277-06
修稿时间:2000年11月6日

Diagnosis of IBV and Typing of the
Abstract:
Keywords:
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