| 实时定量PCR对猪圆环病毒2型感染猪体内病毒分布规律的研究 |
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| 引用本文： | 危艳武,刘长明,袁婧,黄立平,张朝霞.实时定量PCR对猪圆环病毒2型感染猪体内病毒分布规律的研究[J].中国预防兽医学报,2008,30(12). |
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| 作者姓名： | 危艳武 刘长明 袁婧 黄立平 张朝霞 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 引进国际先进农业科学技术计划(948计划)，国家科技支撑计划 |
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| 摘 要： | 根据发表的猪圆环病毒2型（PCV2）ORF2基因序列设计了一对特异引物，并以克隆重组质粒作为阳性标准品，采用SYBR-GreenⅠ嵌合荧光染料建立了一种用于检测PCV2的实时定量PCR方法。该方法在10^7～10^1范围内具有良好的线性关系，相关系数为R2=0．997，扩增效率为E=0．920；对质粒标准品检测下限值为8．2拷贝／μL，检测变异系数低于2．0％。该方法与常规PCR及过氧化物酶单层细胞试验（IPMA）比较，其敏感性提高10^3倍以上。采用该法对PCV2人工感染猪的心、肝、脾、肺、肾、腹股沟淋巴结等组织中病毒核酸载量检测结果表明，在多种脏器中均可检9n,4到病毒，其中腹股沟淋巴结、扁桃体和脾脏中病毒含量较高（为3．4×10^9拷贝儋～1．7×10^10拷贝／g），这表明病毒主要在免疫器官增殖，导致淋巴细胞耗损。对来自国内不同地区的28份临床发病猪病料进行病毒DNA定量检测，有半数以上病料的病毒载量达到10^9-10拷贝／g。实验表明，实时定量PCR可用于PCV2核酸定量检测，为该病毒体内外定量检测提供了一种技术手段。
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒2型 实时定量PCR 病毒体内分布规律 |
Detection of porcine circovirus type 2 distributions in the infected pigs by real-time quantitative PCR |
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| WEI Yan-wu,LIU Chang-ming,YUAN Jing,HUANG Li-ping,ZHANG Zhao-xia.Detection of porcine circovirus type 2 distributions in the infected pigs by real-time quantitative PCR[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2008,30(12). |
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| Authors: | WEI Yan-wu LIU Chang-ming YUAN Jing HUANG Li-ping ZHANG Zhao-xia |
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