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| 兔出血症病毒感染性克隆的优化 | |
| 引用本文： | 杨宗伟,张伟伟,陈宗,李传峰,吴润,刘光清.兔出血症病毒感染性克隆的优化[J].甘肃农业大学学报,2011,46(3). |
| 作者姓名： | 杨宗伟 张伟伟 陈宗 李传峰 吴润 刘光清 |
| 作者单位： | 1. 甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241 2. 中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;浙江师范大学,浙江金华321004 3. 中国农业科学院上海兽医研究所,上海,200241 4. 甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州,730070 5. 中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(30800045,30870114); 兽医生物技术国家重点实验室开放基金(SKLVBF201004) |
| 摘 要： | 为避免细胞外转录步骤,使RHDV感染性克隆的转录和病毒拯救过程一步化,试验通过PCR反应在RHDV cDNA序列的5′端添加T7启动子核心序列,3′端添加具有自身切割功能的核酶核心序列.然后,将RHDV基因组的不同cDNA片段装配到pTVT转录载体中,构建了含有RHDV全长cDNA序列的重组质粒pTVT-RHDV.在转染能稳定表达T7RNA聚合酶的BHK细胞后,将收获的细胞培养物感染MA104细胞.分别用逆转录PCR、间接免疫荧光检测以及一步生长曲线等方法对拯救病毒进行了鉴定.结果表明,试验成功拯救出了RHDV,优化了RHDV感染性克隆的构建过程. |
| 关 键 词： | 兔出血症病毒 病毒拯救 全长cDNA |
Optimiation of infectious clone for rabbit hemorrhagic disease virus |
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| YANG Zong-wei,ZHANG Wei-wei,CHEN Zong-yan,LI Chuan-feng,WU Run,LIU Guang-qing.Optimiation of infectious clone for rabbit hemorrhagic disease virus[J].Journal of Gansu Agricultural University,2011,46(3). | |
| Authors: | YANG Zong-wei ZHANG Wei-wei CHEN Zong-yan LI Chuan-feng WU Run LIU Guang-qing |
| Institution: | YANG Zong-wei1,2,ZHANG Wei-wei2,3,CHEN Zong-yan2,LI Chuan-feng2,WU Run1,LIU Guang-qing2,4(1.College of Veterinary Medicine,Gansu Agricultural University,Lanzhou 730070,China,2.Shanghai Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Shanghai 200241,3.College of Chemistry and Life Science,Zhejiang Normal University,Jinhua 321004,4.National Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Herbin 150001,) |
| Abstract: | |
| Keywords: | rabbit hemorrhagic disease virus virus rescued full length cDNA |
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