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降低木质素、提高抗逆性的无标记植物表达载体的构建
引用本文:杨晓红,陈晓阳.降低木质素、提高抗逆性的无标记植物表达载体的构建[J].江西农业大学学报,2008,30(6).
作者姓名:杨晓红  陈晓阳
作者单位:1. 北京林业大学 国家花木遗传育种与基因工程重点实验室,北京,100083;北京农学院,园林系,北京,100026
2. 北京林业大学 国家花木遗传育种与基因工程重点实验室,北京,100083;华南农业大学,林学院,广东,广州,510642
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划),北京市科委科研项目 
摘    要:采用高保真酶用PCR方法从pM018-BADH载体上扩增出目的基因BADH,替换pBI121质粒中的gus基因,构建pBI121-BADH植物表达载体。经过2对引物检测,证明pBI121-BADH载体构建正确。又从pBI121-BADH质粒中扩增出35s—BADH-nos片段,所用引物加上了Nhe I和Cla I接头,扩增片段经回收后插入到pUCm—T载体中测序。测序表明,所扩增的35s—BADH—nos片段与模版同源性为100%。将测序正确的质粒pUCm-35s—BADH-nos用Nhe I和Cla I酶切后连接到进行了相同酶切的pBI121-xylA载体上,用35s—BADH—nos片段取代pBI121-xylA载体上的npt Ⅱ基因片段,构建pBI121-xflA-BADH双元植物表达载体,该载体经PCR检测和酶切检测,与预期结果相同。最后,用Pme I、Cla I从pBI121-xylA—BADH上切出片段35s—BADH—nos,将其连接到进行了相同酶切的pt4CL1-P载体上,使35s—BADH-nos片段取代pt4CL1-P载体上的npt Ⅱ基因片段,构建了无选择标记的反义4CL—BADH植物双元表达载体。

关 键 词:反义4CL基因  甜菜碱醛脱氢酶基因  无选择标记  植物表达载体

Construction of Marker Free Plant Expression Vectors with Lower Lignin and Improved Drought/salt Tolerance
YANG Xiao-hong,CHEN Xiao-yang.Construction of Marker Free Plant Expression Vectors with Lower Lignin and Improved Drought/salt Tolerance[J].Acta Agriculturae Universitis Jiangxiensis,2008,30(6).
Authors:YANG Xiao-hong  CHEN Xiao-yang
Abstract:
Keywords:
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