| 粪肠球菌Ace抗原表位预测及重组表位 疫苗载体构建与表达 |
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| 引用本文： | 郭珍珍,和春昊,李滨洲,楚红燕,张晨昕,杨国宇,陈丽颖.粪肠球菌Ace抗原表位预测及重组表位 疫苗载体构建与表达[J].河南农业大学学报,2019,53(3). |
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| 作者姓名： | 郭珍珍 和春昊 李滨洲 楚红燕 张晨昕 杨国宇 陈丽颖 |
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| 作者单位： | 河南农业大学牧医工程学院,河南 郑州,450002;北京化工大学国际教育学院,北京,102200;河南农业大学牧医工程学院,河南 郑州450002;河南省动物性食品安全重点实验室,河南 郑州450002 |
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| 摘 要： | 利用生物信息学软件预测抗原表位,然后将筛选出的6个抗原表位基因片段分别与铁蛋白H亚基基因片段连接,并克隆到p ET-32a表达载体中,构建能融合表达Ace抗原表位和铁蛋白H亚基的重组质粒p ET-32aace1、p ET-32a-ace2、p ET-32a-ace3、p ET-32a-ace4、p ET-32a-ace5、p ET-32a-ace6,并经测序验证;优化诱导条件获得原核表达的重组蛋白后,用SDS-PAGE和Western Blot验证其相对分子质量大小和免疫原性;将重组蛋白进行纯化超滤,然后进行透射电镜成像检查。结果显示,本研究成功构建了7种原核表达载体;在IPTG诱导下获得了5种可溶性表达的融合蛋白,且均有较强的免疫原性;重组融合蛋白Ace1-H、Ace3-H、Ace5-H和Ace6-H在透射电镜下观察到了具有与天然铁蛋白类似的特殊中空结构,且其直径与天然铁蛋白纳米笼类似;而带多表位的重组蛋白Ace-H虽然也能自组装成纳米级颗粒,但没有中空核心,其直径也比天然铁蛋白略大。
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| 关 键 词： | 粪肠球菌 胶原蛋白黏附素 铁蛋白 纳米笼 表位 |
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