| 鸡α干扰素/白细胞介素18基因的融合表达及抗病毒活性研究 |
| |
| 引用本文： | 何静,张盼盼,孙敏华,康银峰,谢鹏,向斌,韩翡,谭阳通,任涛.鸡α干扰素/白细胞介素18基因的融合表达及抗病毒活性研究[J].华南农业大学学报,2015,36(1):18-22. |
| |
| 作者姓名： | 何静 张盼盼 孙敏华 康银峰 谢鹏 向斌 韩翡 谭阳通 任涛 |
| |
| 作者单位： | 华南农业大学兽医学院/人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室/农业部兽用疫苗创制重点实验室/广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室,广东广州,510642 |
| |
| 基金项目： | 广东省战略性新兴产业核心技术攻关（2012A020800006） |
| |
| 摘 要： | 【目的】构建原核表达载体p ET28a-r Ch IFN-α-Ch IL-18、大肠埃希菌Escherichia coli表达及产物纯化与活性检测,研究高效广谱鸡基因工程重组复合抗病毒制剂,以对鸡的病毒性疾病进行防治.【方法】采用融合PCR(Fusion PCR)方法,利用具有互补末端的引物,形成具有重叠链的PCR产物,通过PCR产物重叠链的延伸将鸡α干扰素(Chicken interferon alpha,Ch IFN-α)与鸡白细胞介素18(Chicken interleukin-18,Ch IL-18)基因构建Ch IFN-α-Ch IL-18融合基因并克隆入p ET-28a原核表达载体中进行原核表达.通过镍柱亲和层析法纯化可溶性蛋白,并进行SDSPAGE分析、Western-blot鉴定.采用细胞病变抑制法检测r Ch IFN-α-Ch IL-18蛋白在细胞上抑制水泡性口炎病毒(VSV)及新城疫病毒(NDV)增殖活性.【结果和结论】成功构建并克隆了p ET28a-r Ch IFN-α-Ch IL-18融合基因.融合基因在大肠埃希菌中表达的r Ch IFN-α-Ch IL-18蛋白相对分子质量约为38 000,蛋白经纯化后纯度在90%以上.r Ch IFN-α-Ch IL-18蛋白在鸡胚成纤维(CEF)细胞上具有明显抗病毒活性,其抗VSV和NDV的活性明显高于单一r Ch IFN-α、r Ch IL-18蛋白的抗病毒活性.
|
| 关 键 词： | 鸡α干扰素 鸡白细胞介素18 融合PCR 抗病毒活性 |
| 收稿时间： | 2014/2/24 0:00:00 |
Expressions and antiviral bioactivities of chicken interferon α/chicken interleukin-18 fusion protein |
| |
| HE Jing,ZHANG Panpan,SUN Minhu,KANG Yinfeng,XIE Peng,XIANG Bin,HAN Fei,TAN Yangtong and REN Tao.Expressions and antiviral bioactivities of chicken interferon α/chicken interleukin-18 fusion protein[J].Journal of South China Agricultural University,2015,36(1):18-22. |
| |
| Authors: | HE Jing ZHANG Panpan SUN Minhu KANG Yinfeng XIE Peng XIANG Bin HAN Fei TAN Yangtong and REN Tao |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | chicken interferon alpha chicken interleukin-18 fusion PCR antiviral activity |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《华南农业大学学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《华南农业大学学报》下载免费的PDF全文 |
|
