| 牛病毒性腹泻病毒和牛轮状病毒TaqMan二重实时荧光RT-PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 范晴,谢芝勋,刘加波,庞耀珊,邓显文,谢志勤,谢丽基,彭宜.牛病毒性腹泻病毒和牛轮状病毒TaqMan二重实时荧光RT-PCR检测方法的建立[J].中国兽医学报,2011,31(10). |
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| 作者姓名： | 范晴 谢芝勋 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢志勤 谢丽基 彭宜 |
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| 作者单位： | 广西兽医研究所,广西南宁,530001 |
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| 基金项目： | 国家百千万人才工程人选专项资金资助项目(945200603); 广西科技攻关与新产品试制资助项目(桂科合0992033-5) |
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| 摘 要： | 根据牛病毒性腹泻病毒（BVDV）5′端非编码区和牛轮状病毒（BRV）VP6基因序列,设计特异性引物和探针。通过对引物和探针浓度、Mg2＋浓度、dNTP浓度和Taq酶用量以及反应条件等因素的优化筛选,建立了能同时鉴别BVDV和BRV的二重荧光RT-PCR方法。该方法特异性好,与其他病原如CSFV、MB和IBRV不发生交叉反应;敏感性高,能够检测100个BVDV RNA和100个BRV RNA;稳定性好,批内重复和批间重复变异系数小;干扰性试验表明该方法能同时检测2个模板的不同浓度组合。本研究建立的二重荧光RT-PCR方法可用于BVDV和BRV检测,具有特异、敏感、快速、稳定等优点,是BVDV和BRV基础研究、流行病学调查和临床检测的良好工具。
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| 关 键 词： | 牛病毒性腹泻病毒 牛轮状病毒 TaqMan二重荧光RT-PCR |
Detection of bovine viral diarrhea virus and bovine rotavirus by TaqMan based real-time RT-PCR |
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| FAN Qing,XIE Zhi-xun,LIU Jia-bo,PANG Yao-shan,DENG Xian-wen,XIE Zhi-qin,XIE Li-ji,PENG Yi.Detection of bovine viral diarrhea virus and bovine rotavirus by TaqMan based real-time RT-PCR[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2011,31(10). |
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| Authors: | FAN Qing XIE Zhi-xun LIU Jia-bo PANG Yao-shan DENG Xian-wen XIE Zhi-qin XIE Li-ji PENG Yi |
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| Institution: | FAN Qing,XIE Zhi-xun*,LIU Jia-bo,PANG Yao-shan,DENG Xian-wen,XIE Zhi-qin,XIE Li-ji,PENG Yi(Guangxi Veterinary Research Institute,Nanning 530001,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | BVDV BRV TaqMan-based duplex real-time RT-PCR |
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