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| 含绿脓杆菌外毒素A受体结合区重组蛋白的纯化 | |
| 引用本文： | 刘晓明,郭学军.含绿脓杆菌外毒素A受体结合区重组蛋白的纯化[J].中国兽医学报,1998,18(1):38-41. |
| 作者姓名： | 刘晓明 郭学军 |
| 作者单位： | 解放军农牧大学军事兽医研究所 |
| 摘 要： | 将表达含绿脓杆菌外毒素（ＰＥＡ）受体结合区基因的质粒ｐＥＴ－ＥＡＢ转化到大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中，经ＩＰＴＧ诱导表达了含ＰＥＡ受体结合区的重组蛋白（称ＰＥ３４）。ＰＥ３４主要以包涵体形式存在于大肠杆菌中，用溶菌酶－脱氧胆酸钠法结合超声波裂解法破碎细菌，离心制备包涵体。用２ｍｏｌ／Ｌ脲洗涤包涵体后，包涵体纯度可达７５％，在８ｍｏｌ／Ｌ脲存在条件下，ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００凝胶滤过，ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｌｏｗ离子交换层析纯化，获得ＳＤＳ－ＰＡＧＥ１条带的ＰＥ３４，纯度达９５．８％，得率为２４．５％。 |
| 关 键 词： | 绿脓杆菌外毒素A 大肠杆菌 包涵体 纯化 |
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