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猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白的表达及其单克隆抗体的制备
引用本文:周艳君,安同庆,刘金霞,田志军,彭金美,华荣虹,仇华吉,王云峰,王玫,童光志.猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白的表达及其单克隆抗体的制备[J].广西农业生物科学,2006,25(Z1):212-212.
作者姓名:周艳君  安同庆  刘金霞  田志军  彭金美  华荣虹  仇华吉  王云峰  王玫  童光志
作者单位:中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划) , 国家自然科学基金
摘    要:猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and resp iratory syndrom e,PRRS)是以妊娠母猪繁殖失败和仔猪出现呼吸困难为特征的传染病,PRRSV是该病的病原体。将PRRSV CH-1a株ORF6基因疏水性较强的区域删除后,克隆于pGEX-6p-1载体中,转化大肠杆菌,并进行诱导表达。经SDS-PAGA分析发现,表达了M r约为37 000的融合蛋白rtM,W estern b lot分析证实,重组蛋白能被PRRSV抗血清所识别。收获融合表达的rtM,按50μg/只的剂量与等量弗氏佐剂乳化后,经腹腔接种BALB/c小鼠,免疫3次后,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,用rtM作为包被抗原,通过间接EL ISA方法筛选阳性克隆,结果获得了1株能稳定分泌抗rtM蛋白抗体的杂交瘤细胞株,将其命名为M 2B3。间接免疫荧光检测结果发现,所获得的单克隆抗体能与PRRSV感染细胞产生特异性免疫荧光。亚型鉴定结果显示,单克隆抗体M 2B3为IgG 1型,其轻链均为κ链。研究获得的融合蛋白rtM及单克隆抗体将为今后深入研究PRRSV病毒结构和功能,分析M蛋白的抗原表位等提供有益帮助。

关 键 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒  M蛋白  表达  单克隆抗体
文章编号:1008-3464(2006)增-0212-01
修稿时间:2006年8月13日

Generation of a monoclonal antibody against the protein M of porcine reproductive andrespiratory syndrome virus
ZHOU Yan-jun,AN Tong-qing,LIU Jin-xia,TIAN Zhi-jun,PENG Jin-mei,HUA Rong-hong,QIU Hua-ji,WANG Yun-feng,WANG Mei,TONG Guang-zhi.Generation of a monoclonal antibody against the protein M of porcine reproductive andrespiratory syndrome virus[J].Journal of Guangxi Agricultural and Biological Science,2006,25(Z1):212-212.
Authors:ZHOU Yan-jun  AN Tong-qing  LIU Jin-xia  TIAN Zhi-jun  PENG Jin-mei  HUA Rong-hong  QIU Hua-ji  WANG Yun-feng  WANG Mei  TONG Guang-zhi
Abstract:
Keywords:porcine reproductive and resp iratory syndrom e v irus  protein M  expression  m onoclonal antibody  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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