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猪脐静脉血管内皮细胞分离培养和鉴定
摘    要:为了建立成熟的猪脐静脉血管内皮细胞(SUVECs)分离培养和鉴定体系,采用1%的I型胶原酶灌注法分离细胞,计数板计数,以10%1640培养基于37℃、5%CO2条件下培养;待融合80%左右胰蛋白酶消化1:2传代,利用倒置显微镜观察细胞生长状态及形态;采用血管性血友病因子(VWF)和血小板-内皮细胞粘附分子(PECAM-1/CD31)进行免疫荧光细胞鉴定;利用ICELLigence细胞功能分析仪测定细胞活力和生长曲线。研究从30头新生仔猪脐带(8~15cm)中分离到超过107个细胞,VWF和CD31双重检测阳性,分离得到的SUVECs超过90%,细胞生长状态良好,呈小三角形、椭圆形、梭形、多边形单层生长,界限清晰,融合后呈铺路石状,增殖能力强,符合血管内皮细胞的基本特征,可培养超过15代,为进一步研究猪胎盘血管发生及其对母猪生产性能影响提供可靠细胞模型。

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