猪带绦虫六钩蚴HSP的克隆和表达 |
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引用本文: | 王哲,赵权.猪带绦虫六钩蚴HSP的克隆和表达[J].黑龙江八一农垦大学学报,2013(3):34-37,66. |
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作者姓名: | 王哲 赵权 |
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作者单位: | 黑龙江八一农垦大学动物科技学院;吉林农业大学动物科学技术学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(NO.30972176) |
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摘 要: | 提取猪带绦虫激活和未激活六钩蚴总RNA,RT-PCR扩增HSP目的基因,将目的基因与pGH克隆载体连接,经酶切鉴定后,将阳性重组质粒进行测序,结果扩增出激活的六钩蚴的目的片段。将目的基因亚克隆到原核表达载体pET-28a-HSP中,并将获得的pET28a-HSP阳性重组子转化至宿主菌E.coliBL21,IPTG进行诱导表达,并对重组抗原pET-28a-HSP进行SDS-PAGE和Western-blot检测。结果表明重组经SDS-PAGE分析可见一条约35 kDa大小的融合蛋白条带的抗原,Western-blot结果显示其能被囊虫病人阳性血清识别。这将为进一步阐明六钩蚴入侵中间宿主的机理、设计新型抗猪囊虫病和绦虫病疫苗打下基础。
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关 键 词: | 猪带绦虫六钩蚴 HSP基因 克隆 表达 |
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