| 均匀设计优化兴安落叶松ISSR-PCR反应体系 |
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| 引用本文： | 王洪梅,周志军,李艳霞,王福德,翁海龙,康迎昆,周显昌,李春明,刘洋.均匀设计优化兴安落叶松ISSR-PCR反应体系[J].林业科技,2013,38(1):1-4. |
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| 作者姓名： | 王洪梅 周志军 李艳霞 王福德 翁海龙 康迎昆 周显昌 李春明 刘洋 |
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| 作者单位： | 1. 黑龙江省林业科学研究所,哈尔滨,150081
2. 哈尔滨剑桥三中,黑龙江哈尔滨,150000 |
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| 基金项目： | 国家林业公益性行业科研专项子项目“兴安落叶松种质资源评价与新品种选育及繁殖技术”(201004009-5);黑龙江省森工总局应用研究项目(Y2010012) |
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| 摘 要： | 采用均匀设计方法,对影响兴安落叶松ISSR-PCR体系的MgCl2、dNTPs、引物、TaqDNA聚合酶和模板5个组分的浓度进行了U16(45)和U12 (35)两轮优化,建立了适合于兴安落叶松的ISSR-PCR反应体系.该优化的20μL反应体系包含MgCl2 3.0 mmol/L、dNTPs 0.15 mmol/L、引物0.5μmol/L、TaqDNA聚合酶1.0U、模板20ng/20μL.并进一步进行梯度退火试验,找到了最适的兴安落叶松ISSR退火温度为56.5℃.利用所确立的体系对部分兴安落叶松种质进行扩增的结果清晰可靠,多态性好.
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| 关 键 词： | 兴安落叶松 ISSR 均匀设计 优化体系 |
Optimization of ISSR-PCR Amplification System for Larix gmelinii by Uniform Design |
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| Institution: | WANG Hongmei(Forestry Research Institute of Heilongjiang Province,Harbin 150081) |
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