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过表达KDM4家族基因对猪克隆胚胎体外发育效率的影响
引用本文:梁雅琳,邝哲,李紫聪,王兴旺.过表达KDM4家族基因对猪克隆胚胎体外发育效率的影响[J].黑龙江畜牧兽医,2023(13):55-62+135.
作者姓名:梁雅琳  邝哲  李紫聪  王兴旺
作者单位:1. 华南农业大学动物科学学院动物遗传育种与繁殖系;2. 国家生猪种业工程技术研究中心;3. 畜禽育种国家地方联合工程研究中心;4. 广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室;5. 广东茂名农林科技职业学院动物科学系
摘    要:为了探究过表达H3K9me3的组蛋白去甲基化酶4(KDM4)家族基因对猪克隆胚胎体外发育效率的影响,试验采用pc-KDM4A~D质粒构建、酶切鉴定、细胞转染、定量PCR扩增及体外转录等方法制备过表达KDM4A~D的猪胎儿成纤维细胞和KDM4A~D mRNAs,通过体细胞核移植和显微注射的方式制备过表达KDM4A~D的猪克隆胚胎。将供体细胞过表达KDM4A~D的猪克隆胚胎分为1个对照组和5个试验组,分别为pcDNA3.1(+)组、pc-KDM4A组、pc-KDM4B组、pc-KDM4C组、pc-KDM4D组及4质粒组;将注射KDM4A~D mRNA的猪克隆胚胎分为1个对照组和5个试验组,分别为H2O组、KDM4A组、KDM4B组、KDM4C组、KDM4D组及4mRNA组。统计各组的卵裂数、囊胚数和囊胚细胞数;利用免疫荧光检测4质粒组和4mRNA组4-细胞期猪克隆胚胎中H3K9me3的表达水平。结果表明:pc-KDM4A~D质粒构建成功,质粒转染的猪胎儿成纤维细胞可过表达KDM4A~D和降低细胞内H3K9me3水平。与pcDNA3.1(+)组比较,4质粒组可显著提高猪...

关 键 词:组蛋白去甲基化酶4(KDM4)  H3K9me3  克隆胚胎  重编程  
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