| 猪流行性腹泻病毒纤突蛋白S1抗原表位的串联表达及免疫原性分析 |
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| 引用本文： | 刘阳坤,王国川,韩雪英,冷超粮,姚伦广.猪流行性腹泻病毒纤突蛋白S1抗原表位的串联表达及免疫原性分析[J].黑龙江畜牧兽医,2023(15):1-7+129. |
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| 作者姓名： | 刘阳坤 王国川 韩雪英 冷超粮 姚伦广 |
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| 作者单位： | 1. 南阳师范学院生命科学与农业工程学院;2. 河南省畜禽保健品工程技术中心;3. 西北农林科技大学动物医学院 |
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| 摘 要： | 为了获得猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)纤突蛋白S1抗原表位的串联重组蛋白并评价其免疫原性，试验将S1蛋白的抗原表位COE和S1D连接起来组成串联表位S1CD,合成相应的基因片段后克隆至转移载体pFastBac1上，然后转化到大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中，通过蓝白斑和PCR扩增筛选重组杆状病毒穿梭质粒Bacmid-S1CD,再转染Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒，采用间接免疫荧光试验和Western-blot检测方法鉴定重组蛋白S1CD的表达情况。将小鼠随机均分为S1CD蛋白组、PEDV灭活疫苗组和PBS组，分别经背部皮下多点注射重组蛋白S1CD、PEDV HeN170821灭活病毒和PBS与弗氏佐剂等体积混合制成的抗原，检测特异性IgG抗体水平及白细胞介素-4(IL-4)和γ干扰素(IFN-γ)含量以评价重组蛋白S1CD的免疫原性。结果表明：重组蛋白S1CD成功在Sf9昆虫细胞中表达，并能与鼠抗His单克隆抗体和PEDV阳性血清发生特异性反应；首次免疫后第28天，S1CD蛋白组的特异性IgG抗体水平极显著高于PBS组(...
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| 关 键 词： | 猪流行性腹泻病毒(PEDV) S1蛋白 抗原表位 串联表达 免疫原性 |
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