| 鸭坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ-Ⅱ与Ⅲ的反应原性和免疫原性比较 |
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| 引用本文： | 曲哲会,鲁绍芳,郭晓秋,陈敏,焦凤超,王梦瑶,魏星,马君钊,张茹,黄立,张喜文.鸭坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ-Ⅱ与Ⅲ的反应原性和免疫原性比较[J].黑龙江畜牧兽医,2023(20):89-95+100. |
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| 作者姓名： | 曲哲会 鲁绍芳 郭晓秋 陈敏 焦凤超 王梦瑶 魏星 马君钊 张茹 黄立 张喜文 |
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| 作者单位： | 1. 信阳农林学院动物科技学院;2. 河南省水禽资源开发利用与疫病防控工程技术研究中心;3. 信阳市畜禽重大疫病防控综合技术研究重点实验室 |
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| 基金项目： | 河南省科技攻关项目(222102110188)； |
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| 摘 要： | 为了比较鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus, DTMUV)E蛋白结构域Ⅰ-Ⅱ(EDⅠ-Ⅱ)与结构域Ⅲ(EDⅢ)的反应原性和免疫原性，试验将重组质粒pET-EDⅠ-ⅡEDⅠ-Ⅱ基因插入表达载体pET-30a(+)构建的重组质粒]和pET-EDⅢEDⅢ基因插入表达载体pET-30a(+)构建的重组质粒]分别转化至大肠杆菌(E.coli)Rosetta(DE3)感受态细胞，经IPTG诱导后，对表达产物进行SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定，采用亲和层析法纯化重组蛋白EDⅠ-Ⅱ和EDⅢ,通过Dot-blot试验和间接ELISA试验比较二者的反应原性；将重组蛋白EDⅠ-Ⅱ和EDⅢ免疫小鼠，通过测定免疫小鼠血清中特异性抗体、病毒中和(VN)抗体和细胞因子(IL-6、IFN-γ)水平比较两者的免疫原性；将DTMUV分离株感染重组蛋白EDⅠ-Ⅱ和EDⅢ免疫小鼠，采用实时荧光定量PCR方法检测小鼠肺脏、肝脏和脑组织中DTMUV RNA相对表达水平，比较重组蛋白EDⅠ-Ⅱ和EDⅢ对免疫小鼠的保护力。结果表明：含重组质粒pET-EDⅠ-Ⅱ和pET-EDⅢ诱导4 h的菌体蛋...
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| 关 键 词： | 鸭坦布苏病毒 E蛋白 结构域 反应原性 免疫原性 |
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