| 东北林蛙皮肤抗菌肽基因在毕赤酵母中表达条件的优化 |
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| 引用本文： | 崔绍鹏,周旋,朱熬,肖向红,张晶钰.东北林蛙皮肤抗菌肽基因在毕赤酵母中表达条件的优化[J].野生动物,2013,34(1):32-36. |
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| 作者姓名： | 崔绍鹏 周旋 朱熬 肖向红 张晶钰 |
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| 作者单位： | 东北林业大学野生动物资源学院,哈尔滨,150040 |
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| 基金项目： | 国家级大学生创新项目，国家自然科学基金项目，黑龙江省自然科学基金重点项目 |
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| 摘 要： | 目的:确定毕赤酵母表达东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST基因的最佳诱导表达条件。方法:本研究将PCR合成的dybowskin-1ST基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建pPIC9K-dybowskin-1ST诱导型表达载体。表达载体经线性化后转化巴斯德毕赤酵母GS115,应用BMMY培养基诱导表达。采用单一变量法及正交试验法,对甲醇诱导的浓度、时间和温度进行了优化,通过SDS-PAGE电泳分析和体外抑菌试验检测目的肽表达丰度。结果:最佳诱导条件:甲醇终浓度为0.5%、诱导时间为72 h、诱导温度为28℃,在此条件下表达产物SDS-PAGE电泳条带灰度值为117,抑菌环直径为28.16mm,可为规模化的抗菌肽表达提供参考数据。
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| 关 键 词： | 抗菌肽 毕赤酵母 表达条件 |
Optimization of Pichia pastoris Expression of Rana dybowskii Antimicrobial Peptide Gene |
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| Authors: | Cui Shaopeng Zhou Xuan Zhu Ao Xiao Xianghong Zhang Jingyu |
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| Institution: | Cui Shaopeng Zhou Xuan Zhu Ao Xiao Xianghong* Zhang Jingyu (College of Wildlife Resources,Northeast Forestry University,Harbin,150040,China) |
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