| 流感病毒H1/H3亚型通用双重短探针实时RT-PCR检测技术与标准质控品研究 |
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| 引用本文： | 高志强,张鹤晓,乔彩霞,蒲静,张利峰,张伟,谷强.流感病毒H1/H3亚型通用双重短探针实时RT-PCR检测技术与标准质控品研究[J].中国兽医杂志,2012,48(9):3-6. |
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| 作者姓名： | 高志强 张鹤晓 乔彩霞 蒲静 张利峰 张伟 谷强 |
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| 作者单位： | 北京出入境检验检疫局,北京通州,101113 |
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| 基金项目： | 国家科技基础性工作专项项目(2008FY130100);动物流感检测技术国家标准专项;质检公益性行业科研专项;动物A型流感标准物质研制与快速分型检测(201010067) |
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| 摘 要： | 采用TaqMan方法,在对人、禽、猪以及马流感病毒代表株HA序列多重比对基础上,设计合成动物流感病毒H1亚型和H3亚型的兼并引物和LNA和MGB修饰短探针,经反应条件优化,建立了针对流感病毒H1亚型及H3亚型的双重实时RT-PCR检测方法.应用建立的方法分别对人、禽、猪以及马流感病毒核酸进行检测,结果显示,建立的方法通用性良好,可有效检测和鉴别H1和H3亚型流感病毒,但对其他亚型的流感病毒以及新城疫病毒核酸检测结果为阴性,表明建立的方法特异性强.进一步经体外转录制备了猪流感病毒H1和H3亚型HA完成编码区的核酸标准品cRNA,经稀释、分装、定量、均匀性和稳定性检验后,作为方法的质控品对建立的方法进行评价,结果表明,所建立的双重短探针实时RT-PCR方法灵敏度可达2.0×102拷贝/反应.在对586份临床样品的检测中,进一步证实了该方法快速、灵敏且重复性好,可满足动物流感病毒H1/H3亚型的早期快速检测的需求.
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| 关 键 词： | 动物流感病毒 H1/H3亚型 通用双重 短探针 实时RT-PCR |
Development of the Universal Duplex Real-time RT-PCR for Detection of Influenza Virus Subtype H1/H3 Based on the Short-probe and Preparation of Reference Materials for Quality Control |
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| GAO Zhi-qiang
,
ZHANG He-xiao
,
QIAO Cai-xia
,
PU Jing
,
ZHANG Li-feng
,
ZHANG Wei
,
GU Qiang.Development of the Universal Duplex Real-time RT-PCR for Detection of Influenza Virus Subtype H1/H3 Based on the Short-probe and Preparation of Reference Materials for Quality Control[J].Chinese Journal of Veterinary Medicine,2012,48(9):3-6. |
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| Authors: | GAO Zhi-qiang ZHANG He-xiao QIAO Cai-xia PU Jing ZHANG Li-feng ZHANG Wei GU Qiang |
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| Institution: | (Beijing Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Beijing 101113,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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