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猪博卡病毒1型nPCR检测方法的建立与\=SXWN20株基因序列分析
引用本文:朱小甫,吴旭锦,郑红青,尹宝英,熊忙利,张文娟,张兆顺.猪博卡病毒1型nPCR检测方法的建立与\=SXWN20株基因序列分析[J].陕西农业科学,2022(11):82-86.
作者姓名:朱小甫  吴旭锦  郑红青  尹宝英  熊忙利  张文娟  张兆顺
作者单位:(咸阳职业技术学院,咸阳市动物疫病分子生物学诊断技术研究重点实验室,陕西 咸阳 712000)
摘    要:建立了检测猪博卡病毒1型(PBoV)的nPCR方法,对陕西省部分猪群PBoV1型感染情况进行流行病学调查。通过优化反应体系与条件,测试了方法的灵敏性和特异性,建立了PBoV1型nPCR检测方法,并对阳性样品进行测序分析。结果表明,建立nPCR方法检测PBoV1型单链DNA的极限为4.742×10-2 ng/μL,该方法与PCV2、PCV3、PPV、猪链球菌和猪大肠杆菌DNA均无交叉反应,特异性良好。检测了陕西省猪场60份样品,PBoV1型阳性率为3.33%(2/60)。测序获得的SXWN20株VP1/VP2基因序列比对发现,SXWN20株与参比的PBoV1型毒株核苷酸同源性为96.6%~97.5%,与PBoV2/3/4/5型JP]同源性仅为53.8%~59.7%。进化树分析显示,所有参比毒株分为3个大分支,SXWN20株与PBoV1型毒株处在一个进化分支,PBoV2型处在一个进化分支,PBoV3/4/5型处在一个进化分支。

关 键 词:猪博卡病毒  核酸检测  序列分析  聚合酶链式反应

Construction of An nPCR Detection Method for Porcine Boca Virus Type 1 and Gene Sequence Analysis of SXWN20 Strain
ZHU Xiaofu,WU Xujin,ZHENG Hongqing,YIN Baoying,XIONG Mangli,ZHANG Wenjuan,ZHANG Zhaoshun.Construction of An nPCR Detection Method for Porcine Boca Virus Type 1 and Gene Sequence Analysis of SXWN20 Strain[J].Shaanxi Journal of Agricultural Sciences,2022(11):82-86.
Authors:ZHU Xiaofu  WU Xujin  ZHENG Hongqing  YIN Baoying  XIONG Mangli  ZHANG Wenjuan  ZHANG Zhaoshun
Abstract:
Keywords:Porcine boca virus  Nucleic acid testing  Sequence analysis  PCR
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