| 凡纳滨对虾泛素交联酶E2基因的克隆及表达分析 |
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| 引用本文： | 李传香,薛淑霞,刘逸尘,耿绪云,孙金生.凡纳滨对虾泛素交联酶E2基因的克隆及表达分析[J].中国水产科学,2014,21(4). |
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| 作者姓名： | 李传香 薛淑霞 刘逸尘 耿绪云 孙金生 |
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| 作者单位： | 1. 天津市动植物抗性重点实验室 天津师范大学 生命科学学院, 天津 300381 |
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| 基金项目： | 国家973重点基础研究计划(2012CB114405); 国家863计划项目(2012AA10A401, 2012AA092205). |
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| 摘 要： | 首先在凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)转录组测序的基础上, 应用RT-PCR方法获得了凡纳滨对虾泛素交联酶E2 (UE2)基因的开放阅读框序列。该序列长为447 bp, 编码148个氨基酸, 理论相对分子量为16.84 kD, 等电点为4.90。同源性比对和系统进化分析显示, 不同物种的UE2基因具有较高的同源性, 其中凡纳滨对虾与中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)的同源性最高并聚为一支。半定量RT-PCR分析表明, UE2基因在所检测的组织中均有表达; 实时定量PCR分析表明, UE2基因在肝胰腺和肠中的表达量最高, 在心脏、鳃、胃和肌肉组织中的表达量略低, 在血淋巴中的表达量最低。原核表达分析结果显示, PCR®T7/NT-Topo TA-UE2表达载体在1.0 mmol/L IPTG、37℃诱导3 h条件下可获得纯度较高的分子量约17 kD的蛋白。利用亲和层析的方法将蛋白进行纯化用以制备抗体。研究结果将为深入研究UE2基因在对虾白斑综合症病毒侵染过程中的作用机制奠定基础。
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| 关 键 词： | 凡纳滨对虾 泛素交联酶E2 组织表达 原核表达 |
| 修稿时间： | 2015/8/3 0:00:00 |
Cloning and expression of ubiquitin-conjugating enzyme E2 in Litopeaneus vannamei |
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| LI Chuanxiang,XUE Shuxi,LIU Yichen,GENG Xuyun,SUN Jinsheng.Cloning and expression of ubiquitin-conjugating enzyme E2 in Litopeaneus vannamei[J].Journal of Fishery Sciences of China,2014,21(4). |
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| Authors: | LI Chuanxiang XUE Shuxi LIU Yichen GENG Xuyun SUN Jinsheng |
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| Institution: | 1. Tianjin Key Laboratory of Resistance of Plants and Animals, College of Life Science, Tianjin Normal University, Tianjin 300381, China; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Key words: Litopeaneus vannamei ubiquitin-conjugating enzyme E2 tissue expression prokaryotic expression |
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