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青蟹呼肠孤病毒和青蟹双顺反子病毒-1双重巢式PCR检测方法的建立
引用本文:张迪,杨铿,苏友禄,冯娟,郭志勋.青蟹呼肠孤病毒和青蟹双顺反子病毒-1双重巢式PCR检测方法的建立[J].中国水产科学,2013,20(4):808-815.
作者姓名:张迪  杨铿  苏友禄  冯娟  郭志勋
作者单位:1. 中国水产科学研究院 南海水产研究所 农业部水产品加工重点实验室, 农业部南海渔业资源开发利用重点实验室, 广东 广州 510300;2. 上海海洋大学 水产与生命学院, 上海 201306
基金项目:广东省科技计划项目(2011A020102002); 广东省海洋渔业科技推广专项(A201001H04); 广东省教育部产学研结合项目(2010B090400519); 中国水产科学研究院基本科研业务费资助(2012TS06).
摘    要:

青蟹呼肠孤病毒(mud crab reovirus, MCRV)和青蟹双顺反子病毒-1(mud crab dicistrovirus-1, MCDV-1)是从近年发生大规模死亡的养殖拟穴青蟹体内分离的、对青蟹具有致病性的两种病毒。它们常常同时存在, 给青蟹养殖业带来巨大经济损失。在疾病的防治中, 快速高效的病毒检测方法对疾病诊断以及及时采取有效地防治措施具有重要的意义。本研究利用MCRVMCDV-1基因保守区设计4对引物, 建立了可同时检测这两种病毒的双重巢式PCR(duplex-nested PCR)检测方法。研究发现该方法对两种病毒的检测限都可以达到10个拷贝, 并与鲍肌肉萎缩病毒(AbSV)、虾类传染性表皮与造血组织坏死症病毒(IHHNV)、大菱鲆红体病虹彩病毒(TRBIV)、对虾白斑综合症病毒(WSSV)、鱼类神经坏死病毒(NNV)和贝类急性病毒性坏死症病毒(AVNV)等水生动物常见病毒均无交叉反应, 可以特异性地检测两种病毒。本方法具有高灵敏度、高特异性和简便快捷等特点, 可作为一种快速诊断工具, 检测拟穴青蟹中的MCRVMCDV-1基因。



关 键 词:拟穴青蟹    青蟹呼肠孤病毒    青蟹双顺反子病毒-1    双重巢式PCR
修稿时间:2013/7/18 0:00:00

A duplex nested-PCR assay for detection of mud crab reovirus and mud crab dicistrovirus-1
ZHANG Di,YANG Keng,SU Youlu,FENG Juan,GUO Zhixun.A duplex nested-PCR assay for detection of mud crab reovirus and mud crab dicistrovirus-1[J].Journal of Fishery Sciences of China,2013,20(4):808-815.
Authors:ZHANG Di  YANG Keng  SU Youlu  FENG Juan  GUO Zhixun
Institution:1. Key Laboratory of Aquatic Product Processing, Ministry of Agriculture, South China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, South China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Guangzhou 51030
Abstract:
Keywords:Scylla paramamosain  MCRV  MCDV-1  duplex-nested PCR
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