| 鲢小清蛋白的cDNA克隆及在大肠杆菌中的原核表达 |
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| 引用本文： | 王慈,曹敏杰,郑晓江,詹春兰,刘光明,蔡秋凤.鲢小清蛋白的cDNA克隆及在大肠杆菌中的原核表达[J].中国水产科学,2014,21(4). |
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| 作者姓名： | 王慈 曹敏杰 郑晓江 詹春兰 刘光明 蔡秋凤 |
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| 作者单位： | 1. 集美大学 生物工程学院, 福建 厦门 361021; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31301440); 福建省科技重大专项(2011NZ0002-1); 福建省自然科学基金项目(2011J01227). |
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| 摘 要： | 以鲢(Hypophthalmichthys molitrix)肌肉cDNA为模板, 利用小清蛋白特异性引物进行PCR扩增, 克隆得到β小清蛋白两种不同亚型, 即Ⅰ型、Ⅱ型编码区基因。将目的基因片段连接到pET28a (+)表达载体, 并在大肠杆菌E.coli BL21 (DE3)]中诱导表达。结果表明, 经诱导的小清蛋白重组质粒菌株有特异的蛋白表达。SDS-PAGE分析显示, 目的蛋白的分子量约为13 kD, 与预期大小一致。菌体超声破碎后发现2种亚型的小清蛋白均为可溶表达。利用Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化, 得到高纯度的重组小清蛋白PVⅠ和PVⅡ。经Western Blot 鉴定, 重组小清蛋白PVⅠ和PVⅡ均能与抗鲢小清蛋白单克隆抗体反应。本研究为进一步分析小清蛋白的结构与致敏性的关系提供了重要的基础。
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| 关 键 词： | 鲢 小清蛋白 cDNA克隆 原核表达 |
| 修稿时间： | 2015/8/3 0:00:00 |
Cloning and prokaryotic expression of parvalbumin from silver carp (Hypophthalmichthy molitrix) skeletal muscle |
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| WANG Ci,CAO Minjie,ZHENG Xiaojiang,ZHAN Chunlan,LIU Guangming,CAI Qiufeng.Cloning and prokaryotic expression of parvalbumin from silver carp (Hypophthalmichthy molitrix) skeletal muscle[J].Journal of Fishery Sciences of China,2014,21(4). |
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| Authors: | WANG Ci CAO Minjie ZHENG Xiaojiang ZHAN Chunlan LIU Guangming CAI Qiufeng |
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| Institution: | 1. School of Biological Engineering, Jimei University, Xiamen 361021, China; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | silver carp parvalbumin cDNA cloning prokaryotic expression |
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