| 罗非鱼无乳链球菌C5a肽酶(ScpB)的原核表达及其免疫原性 |
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| 引用本文： | 李庆勇,可小丽,卢迈新,朱华平,高风英,刘志刚.罗非鱼无乳链球菌C5a肽酶(ScpB)的原核表达及其免疫原性[J].中国水产科学,2014,21(1):169-179. |
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| 作者姓名： | 李庆勇 可小丽 卢迈新 朱华平 高风英 刘志刚 |
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| 作者单位： | 1．中国水产科学研究院 珠江水产研究所, 农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室, 广东, 广州 501380;2. 上海海洋大学 水产与生命学院, 上海 201306 |
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| 基金项目： | 国家现代农业产业技术体系(CARS-49); 广州市科技计划项目(2013J4100078; 201300000064); 农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室开放课题(KF201309). |
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| 摘 要： | 以尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)为鱼体样本,
克隆了罗非鱼源无乳链球菌(Streptococcus
agalactiae) scpB基因, 构建了原核表达质粒pET32a(+)-scpB, 转入大肠杆菌BL21(DE3)后, IPTG诱导表达,
表达的重组蛋白经镍离子金属螯合柱纯化及超滤管浓缩后, 进行SDS-PAGE和Western blot分析鉴定。纯化的重组蛋白以不同剂量(1 μg/g、3 μg/g、5
μg/g) 免疫尼罗罗非鱼后, 每周检测各实验组鱼体血清非特异性免疫指标溶菌酶活性、超氧化物歧化酶(SOD)活力]及抗体水平变化情况, 并于免疫4周后以4倍LD50的剂量对其进行人工攻毒。结果显示, 该重组蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式存在; 对尼罗罗非鱼的相对免疫保护率为69.66%~89.00%, 其中5 μg/g组的相对保护率最高;
受免鱼体血清中溶菌酶活性、SOD活力和抗体水平较对照组有极显著提高(P<0.01),
结果表明,
重组蛋白ScpB具有较强的免疫原性和保护作用。本研究旨在为GBS多肽疫苗的研制奠定基础。
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| 关 键 词： | 罗非鱼 无乳链球菌 C5a肽酶 原核表达 免疫原性 |
| 修稿时间： | 2015/6/30 0:00:00 |
Prokaryotic expression and immunogenicity analysis of C5a peptidase (ScpB) of Streptococcus agalactiae isolated from tilapia |
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| LI Qingyong,KE Xiaoli,LU Maixin,ZHU Huaping,GAO Fengying,LIU Zhigang.Prokaryotic expression and immunogenicity analysis of C5a peptidase (ScpB) of Streptococcus agalactiae isolated from tilapia[J].Journal of Fishery Sciences of China,2014,21(1):169-179. |
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| Authors: | LI Qingyong KE Xiaoli LU Maixin ZHU Huaping GAO Fengying LIU Zhigang |
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| Institution: | 1. Pearl River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fisheries Science, Key Laboratory of Tropical & Sub-tropical Fishery Resource Application & Cultivation, Ministry of Agriculture, Guangzhou 510380, China; 2. College of Fisheries & Life, Shan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Tilapia Streptococcus agalactiae ScpB prokaryotic expression vaccine immunogenicity |
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