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褶纹冠蚌防御素基因特征与表达
引用本文:王鹤,胡宝庆,文春根,胡向萍,程周玉,宁瑞红.褶纹冠蚌防御素基因特征与表达[J].中国水产科学,2013,20(6):1188-1196.
作者姓名:王鹤  胡宝庆  文春根  胡向萍  程周玉  宁瑞红
作者单位:南昌大学 生命科学系, 生命科学研究院, 江西 南昌 330031
基金项目:国家自然基金项目(30960296; 31060359); 淡水生态与生物技术国家重点实验室开放基金项目(2013FB09); 江西省教育厅项目(GJJ12024; GJJ10378); 江西省科技攻关项目(2004).
摘    要:

褶纹冠蚌(Cristaria plicata)样本壳长(9.50±1.05) cm、壳高(6.45±0.81) cm, 暂养1周。40只随机分成试验组和对照组, 每组20只。用Trizol 法提取经诱导刺激后0612243648 h的血液、外套膜、鳃、肝胰腺组织RNA, 构建褶纹冠蚌cDNA文库并从中获得防御素基因cDNA全长序列。结果表明, 褶纹冠蚌防御素序列全长为514 bp, 其中5’ UTR 57 bp; 3’ UTR 242 bp, 含有一个poly(A); 开放阅读框长度为192 bp, 编码63个氨基酸组成的蛋白质, 该蛋白N端为1个由23个氨基酸构成的信号肽, 成熟肽由40个氨基酸组成, 理论等电点为8.72, 分子量为7.13 kD。三级结构预测显示其由一个 α 螺旋和两个 β 折叠片组成, 形成典型的CSαβ结构。通过注射109 cell/mL 的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)刺激褶纹冠蚌, 半定量分析PCR对褶纹冠蚌血液、外套膜、鳃和肝胰腺组织的防御素基因表达, 结果表明, 诱导前防御素基因在外套膜组织中表达量最高, 约为血液和鳃的1.25, 肝胰腺次之。在诱导0612243648 h, 对照组的防御素基因表达量在血液和鳃中无明显变化, 而在外套膜和肝胰腺中则呈现先略有下降而后上升; 试验组防御素基因在血液中 12 h 时表达量最高, 随后略有下降, 而在外套膜、鳃和肝胰腺组织中表达量均在 0 h 时出现峰值, 而后呈现下降趋势; 外套膜和鳃的表达量分别在 24 h 36 h 略有上升。本研究通过分析褶纹冠蚌防御素基因全序列, 并利用嗜水气单胞菌对褶纹冠蚌进行注射感染, 探讨防御素基因的表达规律, 以期为防御素对贝类非特异性免疫的影响提供基础依据。



关 键 词:褶纹冠蚌    防御素    基因表达    序列结构    抗菌肽    嗜水气单胞菌
修稿时间:2013/11/28 0:00:00

Gene characterization and expression of defensin in Cristaria plicata
WANG He,HU Baoqing,WEN Chungen,HU Xiangping,CHEN Zhouyu,NING Ruihong.Gene characterization and expression of defensin in Cristaria plicata[J].Journal of Fishery Sciences of China,2013,20(6):1188-1196.
Authors:WANG He  HU Baoqing  WEN Chungen  HU Xiangping  CHEN Zhouyu  NING Ruihong
Institution:Department of Bioscience, Institute of Life Science, Nanchang University, Nanchang 330031, China
Abstract:
Keywords:Cristaria plicata  defensin  gene expression  sequence structure  mytilin  Aeromonas hydrophila
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