| 环介导等温扩增技术与横向流动试纸条法快速检测鸡贫血病毒的研究 |
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| 引用本文： | 李秀梅,石瑜,朱雅宁,袁雪涛,杨爱华,杨颖.环介导等温扩增技术与横向流动试纸条法快速检测鸡贫血病毒的研究[J].中国动物传染病学报,2018(1). |
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| 作者姓名： | 李秀梅 石瑜 朱雅宁 袁雪涛 杨爱华 杨颖 |
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| 作者单位： | 天津市动物疫病预防控制中心; |
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| 摘 要： | 本研究将环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)与横向流动试纸条技术(lateral flow dipstick,LFD)联合应用,针对鸡贫血病毒Cux-1 VP2基因设计了4条特异性引物和1条异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的探针,并对其反应条件进行优化,建立了一种快速、便捷的鸡贫血病毒LAMP-LFD检测方法。结果显示,优化后的扩增温度和时间为63℃反应50 min,完成检测全过程仅需80 min。该方法检测灵敏度为10 fg,是利用外引物建立的PCR方法的100倍;可特异性地检出鸡贫血病毒;重复性、稳定性好。对30份样品的病毒分离鉴定和LAMP-LFD检测表明,二者符合率为100%。本研究建立的LAMP-LFD方法能够快速、特异地检测鸡贫血病毒,并且不需要其他辅助仪器,结果可直观判断,适合基层实验室、应急检测或现场监测等使用。
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