| 犬干扰素α2的原核表达及抗病毒活性分析 |
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| 引用本文： | 姚凌云,王晶宇,欧阳伟,钱晶,吴世妍,夏兴霞,诸玉梅,王晓丽,潘群兴,芮荣,王永山.犬干扰素α2的原核表达及抗病毒活性分析[J].中国动物传染病学报,2018(2). |
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| 作者姓名： | 姚凌云 王晶宇 欧阳伟 钱晶 吴世妍 夏兴霞 诸玉梅 王晓丽 潘群兴 芮荣 王永山 |
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| 作者单位： | 南京农业大学动物医学院;江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室 |
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| 摘 要： | 本研究将人工合成的犬干扰素α2成熟区序列插入原核表达载体p ET-28a(+)中,构建重组表达质粒p ET-28a-Ca IFN-α2;然后将该质粒转化至大肠杆菌Rosetta感受态中进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot分析鉴定,分子量约为23 k Da的目的蛋白表达,表达的重组蛋白主要以包涵体的形式存在,表达量约占菌体总蛋白的52.5%。包涵体蛋白经变性、复性和纯化处理后,获得的重组Ca IFN-α2纯度为92%;用MDCK/VSV微量细胞病变抑制法检测重组蛋白的抗病毒活性为3.16×106/m L。本研究结果为进一步研制新型犬用干扰素制品奠定了物质基础。
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