| 扁桃CBF2基因的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 郭淑朋,李疆.扁桃CBF2基因的克隆及原核表达[J].中国农学通报,2018,34(13):31-37. |
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| 作者姓名： | 郭淑朋 李疆 |
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| 作者单位： | 新疆农业大学,新疆农业大学 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金“新疆扁桃耐寒基因CBF 在花粉发育中的功能及其花粉发育避寒机制研究”(31360473)；新疆维吾尔自治区园艺学重点 学科基金项目(2016-10758-3)。 |
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| 摘 要： | 为进一步研究扁桃CBF2 目的蛋白功能，探明CBF2 转录因子在扁桃中的抗寒分子机制，以新疆栽培扁桃(Amygdalus communis L.)‘双软’叶片为材料，通过PCR 技术从基因组DNA 中克隆CBF2 基因，命名为AcCBF2，将该基因片段连接到原核表达载体pET-32a(+)上，构建重组质粒pET-AcCBF2 并转化E. coli Rosetta(DE3)感受态细胞中进行诱导表达；生物信息学推测显示该基因的开放阅读框(ORF)为717 bp，编码238 个氨基酸，其分子量为26.59 kD，等电点为5.29。系统发育树分析结果显示，AcCBF2 基因与扁桃CBF1、光核桃和桃的亲缘关系最近。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明，该蛋白分子量约47 kD，与预期蛋白大小基本一致。AcCBF2 基因在E. coli Rosetta 中的最佳诱导条件为IPTG浓度0.2 mmol/L、诱导4 h。
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| 关 键 词： | 葡萄 葡萄 热激转录因子 SSR 分子标记 |
| 收稿时间： | 2017/4/5 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2017/5/15 0:00:00 |
Cloning and Prokaryotic Expression of Almond CBF2 Gene |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | almond clone CBF2 gene bioinformatics prokaryotic expression |
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