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一种改良的猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测方法的建立
引用本文:张鑫玉,吴琼,张涛,周波,温海京,崔德凤,张永红.一种改良的猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测方法的建立[J].北京农学院学报,2022,37(1):56-60.
作者姓名:张鑫玉  吴琼  张涛  周波  温海京  崔德凤  张永红
作者单位:北京农学院动物科学技术学院/兽医学(中医药)北京市重点实验室,北京102206;河北农业大学动物科技学院,保定071000;中牧实业股份有限公司,北京100070
摘    要:目的]利用SYBR Green Ⅰ荧光染料建立一种快速、灵敏的用于检测猪圆环病毒2型的荧光定量PCR方法.方法]根据猪圆环病毒2型ORF2保守区的基因片段,扩增目的基因645 bp插入至PUC57载体,以重组质粒为模板进行荧光定量PCR反应条件优化及灵敏度、特异性等验证.结果]建立的猪圆环病毒2型绝对定量检测方法与猪圆环病毒1型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒、猪博卡病毒无交叉反应.检测猪圆环病毒2型的灵敏度是5.0×101 copies/μL,建立的标准曲线回归方程的相关系数0.999,扩增效率105.403%.结论]成功建立一种特异性强、敏感性高、稳定性良好的绝对定量检测猪圆环病毒2型的荧光定量PCR方法,可以用于临床样品猪圆环病毒2型的检测.

关 键 词:猪圆环病毒2型  荧光定量PCR  绝对定量  检测

Establishment of an improved fluorescence quantitative PCR method for detection of porcine circovirus type 2
ZHANG Xinyu,WU Qiong,ZHANG Tao,ZHOU Bo,WEN Haijing,CUI Defeng,ZHANG Yonghong.Establishment of an improved fluorescence quantitative PCR method for detection of porcine circovirus type 2[J].Journal of Beijing Agricultural College,2022,37(1):56-60.
Authors:ZHANG Xinyu  WU Qiong  ZHANG Tao  ZHOU Bo  WEN Haijing  CUI Defeng  ZHANG Yonghong
Abstract:
Keywords:
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