| 多重PCR对禽分枝杆菌亚种鉴定的初步应用 |
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| 引用本文： | 张 阁,彭 永,刘国权,蒋卉.多重PCR对禽分枝杆菌亚种鉴定的初步应用[J].中国兽药杂志,2017,51(10):11-17. |
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| 作者姓名： | 张 阁 彭 永 刘国权 蒋卉 |
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| 作者单位： | 中国兽医药品监察,中国兽医药品监察,中国兽医药品监察, |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划(2016YFD0500902) |
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| 摘 要： | 为了建立禽分枝杆菌多重PCR方法，给禽分枝杆菌亚种鉴定及禽结核病的诊断提供参考。本实验根据国外报道的诊断方法设计4对特异性引物，选用我国禽结核参考菌株（CVCC 68201）基因组DNA为模板，优化了退火温度，测定了DNA最小检测量，并进行了特异性检验。采用优化好的多重PCR体系，对国家兽医微生物菌种保藏中心保存的禽分枝杆菌标准菌株进行检测和分类。实验结果表明，禽结核参考菌株（CVCC 68201）能很好的扩增出577 bp（IS901基因片段）、385 bp（IS1245基因片段）和140 bp（dnaJ基因片段）三条目的条带，基因组DNA的最小检测量为0.38 ng/μL，目的条带在退火温度50 ℃～62 ℃之间均能得到有效扩增。对23株禽分枝杆菌菌株检测，并设立牛分枝杆菌作为阴性对照，最终将禽分枝杆菌菌株分为三大类：禽亚种/森林土壤亚种、副结核亚种、人猪亚种，与国家兽医微生物菌种保藏中心的分类结果相比不仅一致且更加详尽而有临床意义。因此，基于分子生物学方法建立的多重PCR方法可以对禽分枝杆菌亚型进行快速鉴定并对禽结核病的诊断提供参考。
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| 关 键 词： | 禽分枝杆菌 亚型鉴定 多重PCR |
| 收稿时间： | 2017/4/5 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2017/5/27 0:00:00 |
Use of Multiplex PCR Assay for the Identification of Mycobacterium avium Sub-species |
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| Institution: | China Institute of Veterinary Drug Control,,, |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mycobacterium avium Subtype identification multiplex PCR |
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