| NLRP3炎症复合体的体外构建 |
| |
| 引用本文： | 石玉华,郑梦洁,徐伟,师福山.NLRP3炎症复合体的体外构建[J].中国兽医学报,2019(4):735-738,750. |
| |
| 作者姓名： | 石玉华 郑梦洁 徐伟 师福山 |
| |
| 作者单位： | 1.浙江大学动物科学学院 |
| |
| 基金项目： | 浙江省自然科学基金资助项目(LY18C180001);中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(2018QNA6032) |
| |
| 摘 要： | 为体外构建NLRP3炎症复合体,利用PCR方法扩增目的基因NLRP3、IL-1β、ASC和Pro-Caspase-1,分别连接到相应的载体中,构建重组真核表达质粒p3XFLAG-NLRP3、pEGFP-C1-ASC、pEGFP-C1-IL-1β、PCI-CASP-HA,利用Lipofectamine2000试剂转染到HEK293T细胞后,采用Western blot方法验证各蛋白的表达情况;通过质粒共转染体外构建NLRP3炎症复合体,采用ELISA方法检测IL-1β生成情况。结果显示,3XFLAG-NLRP3、pEGFP-C1-ASC、pEGFP-C1-IL-1β、PCI-CASP-HA重组质粒均被成功构建,各蛋白于HEK293T细胞内均被成功表达;质粒共转染后ELISA检测到高水平的IL-1β生成,表明NLRP3炎症复合体体外构建成功。NLRP3炎症复合体在体外的成功构建,为进一步研究其激活机制奠定了基础。
|
| 关 键 词： | 质粒构建 NLRP3炎症复合体 蛋白表达 |
Reconstruction of the NLRP3 inflammasome in vitro |
| |
| SHI Yu-hua,ZHENG Meng-jie,XU Wei,SHI Fu-shan.Reconstruction of the NLRP3 inflammasome in vitro[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2019(4):735-738,750. |
| |
| Authors: | SHI Yu-hua ZHENG Meng-jie XU Wei SHI Fu-shan |
| |
| Institution: | (College of Animal Science , Zhej iang University ,Hangzhou 310058 ,China) |
| |
| Abstract: | SHI Yu-hua;ZHENG Meng-jie;XU Wei;SHI Fu-shan(College of Animal Science , Zhej iang University ,Hangzhou 310058 ,China) |
| |
| Keywords: | plasmid construction NLRP3 inflammasome protein expression |
| 本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录！ |
|
