| 猪细小病毒7型SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立及临床样品的检测 |
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| 引用本文： | 赵冠宇,解长占,孙文超,张赫,那少龙,李卓昕,张涵,李成辉,哈卓,李金凤,韩继成,南福龙,庄忻雨,张英,金宁一.猪细小病毒7型SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立及临床样品的检测[J].中国兽医学报,2019(10):1885-1889. |
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| 作者姓名： | 赵冠宇 解长占 孙文超 张赫 那少龙 李卓昕 张涵 李成辉 哈卓 李金凤 韩继成 南福龙 庄忻雨 张英 金宁一 |
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| 作者单位： | 1.吉林大学动物医学学院;2.军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所;3.温州大学病毒学研究所;4.延边大学农学院 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划资助项目(2018YFD0500903,2018YFD0500104) |
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| 摘 要： | 采用PCR方法扩增猪细小病毒7型(PPV7)衣壳蛋白基因保守区域493 bp,将其克隆到pMD18-T载体,构建重组质粒作为标准阳性质粒,以其为模板建立用于检测PPV7的SYBR GreenⅠ实时PCR检测方法,并验证其灵敏性、特异性和重复性。结果表明,本试验建立的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法在2.85×10^1~2.85×10^8拷贝/μL呈良好的线性关系,相关系数为0.995,斜率为4.158,灵敏度可达到2.85×10^1拷贝/μL。该方法对于猪繁殖障碍性传染病常见病原如PRRSV、PCV2和PRV未出现特异性扩增,表明特异性好。所有标准曲线在溶解温度为83.103℃时出现单一的特异峰。使用本方法检测了2017年山东地区7家养猪场216份临床样品,总阳性率为12.5%。
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| 关 键 词： | 猪细小病毒7型 实时荧光定量PCR 衣壳蛋白基因 |
| 本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录！ |
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