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鸡源SUMO标签蛋白的鉴定及在IBDV VP2原核表达中的促溶功能
引用本文:辛波,徐琼,李思洁,任东兴,吕传忠,孙阳阳,付旭彬,黄灿平,鲍恩东.鸡源SUMO标签蛋白的鉴定及在IBDV VP2原核表达中的促溶功能[J].中国兽医学报,2019(10):1913-1920.
作者姓名:辛波  徐琼  李思洁  任东兴  吕传忠  孙阳阳  付旭彬  黄灿平  鲍恩东
作者单位:1.南京农业大学动物医学院;2.天津瑞普生物技术股份有限公司研究院;3.天津农学院动物科学与动物医学学院
摘    要:VP2蛋白是传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)的保护性抗原。原核表达中能否获得具有天然构象的可溶性VP2蛋白是研发IBD亚单位疫苗的关键问题。为了解是否存在鸡自体促溶标签蛋白以及外源促溶标签能否在一定程度上促进蛋白的正确折叠,试验对不同物种来源的类泛素蛋白修饰分子(small ubiquitin-like modifier,SUMO)进行比对研究。结果显示,获取到的3种鸡源SUMO蛋白与酵母源SUMO蛋白的氨基酸同源性均高于40%,其中SUMO-1与SUMO-3两种蛋白可以在大肠杆菌中可溶性表达;通过SUMO-1、SUMO-3与VP2蛋白的融合表达,证明了鸡源SUMO蛋白对VP2具有促溶效果,得到的重组菌株P-28A-s1-VP2和P-28A-Os3-VP2琼脂扩散效价均达到1∶16;经过纯化后,融合蛋白SUMO-1-VP2的琼脂扩散效价可达到1∶256;使用SUMO蛋白酶酶切融合蛋白,SDS-PAGE和Western blot结果表明鸡源SUMO蛋白可以被成功切割,说明试验发现的鸡源SUMO蛋白可以作为促溶标签,在亚单位疫苗关键抗原表达中具有广阔的应用前景。

关 键 词:鸡源SUMO蛋白  IBDV  VP2  标签蛋白  融合表达

Identification and functional analysis of SUMO-tag protein from chicken in improving expression level of soluble IBDV VP2 protein
XIN Bo,XU Qiong,LI Si-jie,REN Dong-xing,LYU Chuan-zhong,SUN Yang-yang,FU Xu-bin,HUANG Can-ping,BAO En-dong.Identification and functional analysis of SUMO-tag protein from chicken in improving expression level of soluble IBDV VP2 protein[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2019(10):1913-1920.
Authors:XIN Bo  XU Qiong  LI Si-jie  REN Dong-xing  LYU Chuan-zhong  SUN Yang-yang  FU Xu-bin  HUANG Can-ping  BAO En-dong
Institution:(CoLLege of Veterinary Medicine , Nanjing Agricultural University , Nanjing 210095, China;Tianjin Ringpu Bio-technology Co., Ltd ,Tianjin 300308 ,China;School of Animal Science and Animal Medicine ,Tianjin Agricultural University ,Tianjin 300384, China)
Abstract:XIN Bo;XU Qiong;LI Si-jie;REN Dong-xing;LYU Chuan-zhong;SUN Yang-yang;FU Xu-bin;HUANG Can-ping;BAO En-dong(CoLLege of Veterinary Medicine , Nanjing Agricultural University , Nanjing 210095, China;Tianjin Ringpu Bio-technology Co., Ltd ,Tianjin 300308 ,China;School of Animal Science and Animal Medicine ,Tianjin Agricultural University ,Tianjin 300384, China)
Keywords:chicken source SUMO  infectious bursal disase virus  VP2  label proteins  fusion expression
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