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| 山羊IL-1β IL-8和Mx1因子实时荧光定量检测方法的建立 | |
| 作者单位： | ;1.温州大学病毒学研究所;2.军事科学院军事兽医研究所;3.广西动物疫病预防控制中心;4.广西大学动物科技学院 |
| 摘 要： | 根据GenBank羊炎性细胞因子(IL-1β和IL-8)和Mx1保守序列,设计特异性引物,利用SYBR Green I染料法建立实时荧光定量检测方法。将羊IL-1β、IL-8和Mx1细胞因子基因保守区域克隆到pMD18-T载体,构建标准质粒。分别以标准质粒为模板建立荧光定量PCR反应的标准曲线、熔解曲线。结果表明,羊IL-1β、IL-8和Mx1细胞因子实时荧光定量检测方法Ct值与标准品呈良好的线性关系,R~2均大于0.990,所有稀释度标准品模板出现特异性熔解峰。应用所建立的方法对山羊痘病毒AV41感染山羊外周血淋巴细胞中IL-1β、IL-8和Mx1 mRNA表达水平进行检测,山羊痘病毒AV41可以刺激机体产生较高的炎性细胞因子。建立的羊IL-1β、IL-8和Mx1细胞因子荧光定量检测方法,可以为山羊痘病毒感染后分子免疫机制研究奠定基础。 |
| 关 键 词： | 山羊 炎性细胞因子和Mx1因子 Real-time PCR |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |