| 猪流行性腹泻病毒血清IgA抗体间接ELISA方法的建立 |
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| 引用本文： | 孙立旦,陈立功,周双海,李艳琴,郭海勇,李潭清,宋勤叶.猪流行性腹泻病毒血清IgA抗体间接ELISA方法的建立[J].中国兽医学报,2019(3):381-386. |
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| 作者姓名： | 孙立旦 陈立功 周双海 李艳琴 郭海勇 李潭清 宋勤叶 |
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| 作者单位： | 1.河北农业大学;2.北京农学院动物科学技术学院;3.吉林师范大学生命科学学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31372441);国家重点研发计划资助项目(2016YFD0500703);河北省科技计划资助项目(17226613D-2) |
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| 摘 要： | 建立了检测猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)IgA抗体的间接ELISA方法,旨在为PEDV感染检测与免疫效果评价提供技术手段。以重组PEDV结构蛋白(S1蛋白)作为包被抗原,采用方阵滴定法确定抗原包被浓度、封闭液、稀释液以及待测血清和酶标抗体的最佳工作浓度,建立了PEDV IgA抗体检测间接ELISA方法。进而检测方法的特异性、批内与批间重复性,评价建立方法与国外试剂盒的符合率,分析ELISA检测血清特异性IgA抗体水平与中和抗体的相关性。结果显示,ELISA方法的最佳抗原包被浓度为1 mg/L,封闭液和抗体稀释液为含5%犊牛血清的PBS,待检血清和酶标抗体的工作浓度分别为1∶40与1∶1 500倍稀释。结果表明,该ELISA能够特异地检测PEDV抗体,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型等病毒的抗血清无交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数低于10%,与现有试剂盒的总符合率为94.8%,血清特异性IgA抗体水平与中和抗体呈正相关(r=0.69,P<0.001)。
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| 关 键 词： | 猪流行性腹泻病毒 S1蛋白 间接ELISA IGA 中和抗体 相关性 |
Indirect ELISA for detecting specific IgA antibody in serum to porcine epidemic diarrhea virus |
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| SUN Li-dan,CHEN Li-gong,ZHOU Shuang-hai,LI Yan-qin,GUO Hai-yong,LI Tan-qing,SONG Qin-ye.Indirect ELISA for detecting specific IgA antibody in serum to porcine epidemic diarrhea virus[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2019(3):381-386. |
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| Authors: | SUN Li-dan CHEN Li-gong ZHOU Shuang-hai LI Yan-qin GUO Hai-yong LI Tan-qing SONG Qin-ye |
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| Institution: | (Hebei Agricultural University , Baoding , Hebei 071001, China;College of Animal Science and Technology ^Beijing University of Agriculture ,Beijing 102206,China;College of Life Sciences,Jilin Normal University Siping, Jilin 136000 , China) |
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| Abstract: | SUN Li-dan;CHEN Li-gong;ZHOU Shuang-hai;LI Yan-qin;GUO Hai-yong;LI Tan-qing;SONG Qin-ye(Hebei Agricultural University , Baoding , Hebei 071001, China;College of Animal Science and Technology ^Beijing University of Agriculture ,Beijing 102206,China;College of Life Sciences,Jilin Normal University Siping, Jilin 136000 , China) |
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| Keywords: | porcine epidemic diarrhea virus S1 protein indirect ELISA IgA neutralizing antibody correlation |
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