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| 奶牛ADRP基因超表达细胞株的建立及对细胞脂滴的影响 | |
| 作者单位： | ;1.信阳农林学院牧医工程学院;2.郑州市农林科学研究所;3.郑州市兽药饲料监察所;4.河南农业大学牧医工程学院 |
| 摘 要： | 通过PCR方法扩增奶牛脂肪分化相关蛋白(adipose differentiation-related protein,ADRP)基因的编码区,构建Lenti-ADRP慢病毒重组载体,包装成病毒后感染奶牛乳腺上皮细胞,通过嘌呤霉素筛选获得超表达ADRP细胞株,采用Real-time PCR和Western blot分析细胞株中ADRP基因和蛋白的表达情况;采用尼罗红对脂滴染色,分析ADRP超表达对细胞脂滴的影响。结果显示,克隆的ADRP基因CDS区序列大约1 353 bp,成功构建重组的ADRP慢病毒载体,用5 mg/L嘌呤霉素筛选得到ADRP超表达乳腺上皮细胞株;与对照组细胞相比,超表达细胞株的ADRP基因mRNA水平增加632倍(P0.001),蛋白表达也有所增加;检测脂滴的荧光值发现,ADRP超表达显著增加了细胞脂滴含量(P0.01)。结果表明,超表达ADRP可促进乳腺上皮细胞的脂滴合成。 |
| 关 键 词： | 奶牛 脂肪分化相关蛋白(ADRP) 乳腺上皮细胞 超表达 脂滴 |
Establishment of bovine ADRP overexpression cell line and its effect on lipid droplet |
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| Keywords: | |
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