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| 猪圆环病毒2型ORF3蛋白的原核表达及抗体检测ELISA方法的建立 | |
| 作者单位： | ;1.西北农林科技大学动物医学院 |
| 摘 要： | 通过外源表达PCV2 ORF3蛋白,为ORF3蛋白的抗体制备和检测提供基础材料。根据PCV2的ORF3基因序列设计特异性引物,克隆ORF3全基因,构建重组原核表达质粒,转入大肠埃希菌进行表达,将纯化的蛋白包被ELISA板,建立ORF3抗体检测ELISA方法。结果表明,获得了重组pGEX-6p-1-ORF3原核表达质粒,最佳表达条件为37℃,225 r/min,IPTG 1.0 mmol/L诱导5 h;建立的ELISA检测方法可以检测PCV2阳性血清,与猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清无交叉反应。本试验为ORF3抗体制备提供了基础材料,也为PCV2抗体检测提供了可选择方法。 |
| 关 键 词： | 猪圆环病毒2型 ORF3蛋白 原核表达 间接ELISA 抗体检测 |
Prokaryotic Expression of ORF3 Protein and Establishment of An ELISA Method for PCV2 Antibody Detection |
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