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双抗体夹心ELISA检测戊型肝炎病毒(HEV)抗原方法的建立及对猪群粪便HEV抗原的检测
作者单位:;1.吉林大学动物医学学院;2.青岛易邦生物工程有限公司;3.吉林大学人兽共患病研究所
摘    要:应用大肠杆菌表达及纯化的戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)P1重组蛋白制备的抗体,建立了检测HEV抗原的双抗体夹心ELISA方法,并对吉林省和辽宁省部分地区猪群HEV的感染进行了病原流行病学调查。方阵滴定法确定鼠源捕获抗体IgG最佳包被量为0.2μg,兔源酶标抗体最佳稀释倍数为1∶500。对大量阴性粪便进行了检测与统计学分析,确定了双抗体夹心ELISA检测HEV的判定标准,即当D_(490)≥0.235判定为阳性。特异性、敏感性和重复性的试验结果表明,本试验建立的方法具有特异、敏感、快速和可重复性好等特点。该方法与RT-PCR方法相比,操作简单、便于基层推广使用。对吉林省、辽宁省不同地区猪群粪便进行检测,发现不同地区不同饲养期的猪群均存在着HEV感染,感染率为9%~33%。本试验建立的双抗体夹心ELISA方法检测HEV抗原,为HEV流行病学调查、临床诊断提供了有效的手段。

关 键 词:戊型肝炎病毒  戊型肝炎  双抗体夹心ELISA  病原流行病学调查

Development of a sandwich ELISA for detection of hepatitis E virus antigen and its application for epidemiological investigation
Abstract:
Keywords:
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