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| 猪圆环病毒3型SYBR greenⅠ荧光定量PCR方法建立及初步应用 | |
| 作者单位： | ;1.山东省滨州畜牧兽医研究院山东省畜禽用蜂胶疫苗研究开发推广中心;2.山东绿都生物科技有限公司 |
| 摘 要： | 为建立一种快速、特异、敏感的SYBR greenⅠ实时定量PCR方法,检测猪圆环病毒3型(PCV3)在感染猪体内的分布情况和病毒含量,本研究根据PCV3的cap基因序列设计1对引物,对反应条件、反应体系进行优化,建立了检测PCV3 cap基因的SYBR greenⅠ实时定量PCR方法,并对动物回归试验后剖检的病料组织进行了检测。结果,该方法比传统PCR方法灵敏度高100倍,可达3.04×10~2拷贝/μL,且具有良好的特异性和重复性。在不同病料组织中均可检测到PCV3,但不同感染猪、不同组织病毒检出及含量有差异,其中肝脏、肺脏、颌下淋巴结中病毒含量显著高于心脏、心包肌、肾脏等;肝中病毒拷贝数最高,达1.16×10~6拷贝/μL,表明PCV3具有一定的组织嗜性。该方法可用于PCV3的病原学监测、流行病学调查及定量研究。 |
| 关 键 词： | 猪圆环病毒3型 cap基因 实时定量PCR反应 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |