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杂色鲍原代细胞培养方法的优化及其在基因功能研究中的应用
引用本文:李敏,张丽莉,王国栋,张龙辉,王艺磊.杂色鲍原代细胞培养方法的优化及其在基因功能研究中的应用[J].安徽农业科学,2015(15):146-150.
作者姓名:李敏  张丽莉  王国栋  张龙辉  王艺磊
作者单位:集美大学水产学院,农业部东海海水健康养殖重点实验室,福建厦门361021;集美大学水产生物技术研究所,福建厦门361021
基金项目:国家自然科学基金项目,福建省科技计划重点项目
摘    要:优化了杂色鲍原代细胞的培养条件,并利用原代细胞进行了RNAi和外源基因表达。结果表明,较高的渗透压对血淋巴细胞培养起重要作用,淋巴细胞分离液分离血淋巴细胞更利于其生长。原代细胞培养至第5天,在细胞培养液中添加50μg My D88 dsRNA,能够显著降低My D88 mRNA的表达。p EGFP-N1转染培养5 d的鳃细胞,5 d后可以检测到绿色荧光。该研究表明可以成功培养杂色鲍血和鳃原代细胞,并且利用原代细胞可以进行功能基因表达量调低或调研究,为功能基因注释提供了便利条件。

关 键 词:杂色鲍  原代细胞培养  RNAi  转染

Optimizing Primary Cell Culture Method of Haliotis diversicolor and Its Effect for Gene Function Study
Abstract:
Keywords:Haliotis diversicolor  Primary cell culture  RNAi  Transfection
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